Přejít na obsah
U2OS
Tkáň
Kost, holenní kost
Nemoc
Osteosarkom
Synonyma
U-2 OS, U-2OS, U-2-OS, U2-OS, U20-S, U20S, 2T

Dokumenty

U2OS

Cell line · Číslo výrobku 300364

U2OS cells, an osteosarcoma cell line derived from a human osteosarcoma patient, play a significant role in cancer research, particularly in the study of ...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky U2OS, buněčná linie osteosarkomu odvozená od lidského pacienta s osteosarkomem, hrají významnou roli ve výzkumu rakoviny, zejména při studiu rakoviny kostí. Buňky U2OS se hojně využívají při výzkumu rakoviny, vývoji léků, studiu apoptózy, genetickém výzkumu a radiační onkologii. Hodnota buněk U2OS spočívá v jejich využití pro zkoumání apoptózy a rezistence k lékům, což je nezbytné pro tvorbu inhibitorů malých molekul a podobných terapeutických látek.

V oblasti klinického výzkumu osteosarkomu má buněčná linie U2OS zásadní význam pro zkoumání biologické odpovědi na radioterapii, čímž obohacuje naše znalosti o biologii osteosarkomu. Tyto buňky jsou také klíčové při zkoumání modifikací chromatinu a jejich vlivu na buněčnou biologii, zejména v souvislosti s tvorbou nádorů a progresí rakoviny.

Buněčná linie U2OS, označovaná také jako buněčná linie OS, je uznávaná pro svou schopnost tvorby nádorů in vivo při podávání subkutánních a intramuskulárních injekcí. Nádory vytvořené buňkami U2OS jsou charakterizovány jako sarkomy vysokého stupně a vykazují významnou produkci osteoidu, který je charakteristickým znakem osteosarkomu. Tyto nádory navíc vykazovaly infiltraci imunitními buňkami. U2OS proto slouží jako reprezentativní model pro studium lidského osteosarkomu, jeho interakcí s lidským imunitním systémem a nádorové imunologie. Jednou z výzev je však zajistit, aby buněčná linie U2OS pro osteosarkom přesně odrážela nádory in vivo, vzhledem k variabilitě ve schopnosti tvorby nádorů.

Závěrem lze říci, že buněčné linie sarkomů, jako je U2OS, slouží jako klíčový nástroj pro pochopení osteosarkomu a nabízejí cenné poznatky o biologii nádorů, vývoji léčby a složitosti interakcí mezi nádorem a imunitním systémem, přičemž zdůrazňují potřebu přesného modelování nádorů in vivo.

Tkáň
Kost, holenní kost
Nemoc
Osteosarkom
Synonyma
  • U-2 OS
  • U-2OS
  • U-2-OS
  • U2-OS
  • U20-S
  • U20S
  • 2T

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Karyotyp
(P11-46) hypodiploidní až téměř tetraploidní, (P111-118) modální čísla 34 až 37 a 64 až 67 s abnormalitami včetně dicentrik, zlomů, kroužků a pulverizací a akrocentrických subtelocentrických a minutových markerů

04Identifikátory

Citace
U2OS (katalogové číslo Cytion 300364)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0042

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Růstový faktor podobný inzulínu I (IGF-I), růstový faktor podobný inzulínu II (IGF-I), růstový faktor odvozený od osteosarkomu (ODGF)
Exprese antigenu
Krevní skupina A, Rh+, HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
Isoenzymy
PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotyp Frekvence produktu: 0.0082
Produkty
Růstový faktor odvozený od osteosarkomu (ODGF)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
15 let
Etnická příslušnost
Kavkazský