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U2OS
Tecido
Osso, tíbia
Doença
Osteossarcoma
Sinónimos
U-2 OS, U-2OS, U-2-OS, U2-OS, U20-S, U20S, 2T

Documentos

U2OS

Cell line · Número do produto 300364

U2OS cells, an osteosarcoma cell line derived from a human osteosarcoma patient, play a significant role in cancer research, particularly in the study of ...

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01Informações gerais

Descrição

As células U2OS, uma linha celular de osteossarcoma derivada de um doente com osteossarcoma humano, desempenham um papel importante na investigação do cancro, em especial no estudo do cancro ósseo. As células U2OS são amplamente utilizadas na investigação do cancro, no desenvolvimento de medicamentos, em estudos de apoptose, na investigação genética e em estudos de oncologia por radiação. O valor das células U2OS reside na sua aplicação para investigar a apoptose e a resistência aos medicamentos, essencial para a criação de inibidores de pequenas moléculas e agentes terapêuticos semelhantes.

No domínio da investigação clínica do osteossarcoma, a linha celular U2OS é fundamental para examinar as respostas biológicas à radioterapia, enriquecendo assim a nossa compreensão da biologia do osteossarcoma. Estas células são também fundamentais para investigar as modificações da cromatina e o seu impacto na biologia celular, especialmente no contexto da formação de tumores e da progressão do cancro.

A linha de células U2OS, também referida como linha de células OS, é reconhecida pela sua capacidade de formação de tumores in vivo quando administrada através de injecções subcutâneas e intramusculares. Os tumores produzidos pelas células U2OS são caracterizados como sarcomas de alto grau e exibem uma produção significativa de osteoide, que é uma caraterística do osteossarcoma. Além disso, estes tumores apresentaram infiltração de células imunitárias. Assim, o U2OS serve como modelo representativo para o estudo do osteossarcoma humano, das suas interações com o sistema imunitário humano e da imunologia tumoral. Um dos desafios, no entanto, é garantir que a linha celular U2OS de osteossarcoma reflicta com precisão os tumores in vivo, dada a variabilidade da capacidade de formação de tumores.

Em suma, as linhas celulares de sarcoma, como a U2OS, constituem uma ferramenta fundamental para a compreensão do osteossarcoma, oferecendo informações valiosas sobre a biologia do cancro, o desenvolvimento terapêutico e as complexidades das interações entre o tumor e o sistema imunitário, ao mesmo tempo que realçam a necessidade de uma modelação precisa do tumor in vivo.

Tecido
Osso, tíbia
Doença
Osteossarcoma
Sinónimos
  • U-2 OS
  • U-2OS
  • U-2-OS
  • U2-OS
  • U20-S
  • U20S
  • 2T

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Cariótipo
(P11-46) hipodiplóide a quase tetraploide, (P111-118) números modais 34 a 37 e 64 a 67 com anomalias, incluindo dicêntricos, quebras, anéis e pulverizações, além de marcadores acrocêntricos, subtelocêntricos e de minutos

04Identificadores

Referência
U2OS (número de catálogo Cytion 300364)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0042

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I), fator de crescimento semelhante à insulina II (IGF-I), fator de crescimento derivado do osteossarcoma (ODGF)
Expressão do antígeno
Tipo de sangue A, Rh+, HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
Isoenzimas
PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Produto de frequência fenotípica: 0.0082
Produtos
Fator de crescimento derivado do osteossarcoma (ODGF)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
15 anos
Etnia
Caucasiano