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U2OS
Tessuto
Osso, tibia
Malattia
Osteosarcoma
Sinonimi
U-2 OS, U-2OS, U-2-OS, U2-OS, U20-S, U20S, 2T

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U2OS

Cell line · Codice prodotto 300364

U2OS cells, an osteosarcoma cell line derived from a human osteosarcoma patient, play a significant role in cancer research, particularly in the study of ...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule U2OS, una linea cellulare di osteosarcoma derivata da un paziente umano affetto da osteosarcoma, svolgono un ruolo importante nella ricerca sul cancro, in particolare nello studio del tumore osseo. Le cellule U2OS sono ampiamente utilizzate nella ricerca sul cancro, nello sviluppo di farmaci, negli studi sull'apoptosi, nella ricerca genetica e negli studi di radio-oncologia. Il valore delle cellule U2OS risiede nella loro applicazione per studiare l'apoptosi e la resistenza ai farmaci, essenziale per creare inibitori di piccole molecole e agenti terapeutici simili.

Nel campo della ricerca clinica sull'osteosarcoma, la linea cellulare U2OS è fondamentale per esaminare le risposte biologiche alla radioterapia, arricchendo così la nostra comprensione della biologia dell'osteosarcoma. Queste cellule sono anche fondamentali per studiare le modificazioni della cromatina e il loro impatto sulla biologia cellulare, soprattutto nel contesto della formazione del tumore e della progressione del cancro.

La linea cellulare U2OS, detta anche linea cellulare OS, è nota per la sua capacità di formare tumori in vivo quando viene somministrata attraverso iniezioni sottocutanee e intramuscolari. I tumori prodotti dalle cellule U2OS sono caratterizzati come sarcomi di alto grado e presentano una significativa produzione di osteoide, che è un segno distintivo dell'osteosarcoma. Inoltre, questi tumori hanno mostrato un'infiltrazione di cellule immunitarie. L'U2OS è quindi un modello rappresentativo per studiare l'osteosarcoma umano, le sue interazioni con il sistema immunitario umano e l'immunologia dei tumori. Una delle sfide, tuttavia, è garantire che la linea cellulare U2OS per osteosarcoma rifletta accuratamente i tumori in vivo, data la variabilità della capacità di formazione del tumore.

In sintesi, le linee cellulari di sarcoma come U2OS rappresentano uno strumento fondamentale per la comprensione dell'osteosarcoma, offrendo preziose indicazioni sulla biologia del cancro, sullo sviluppo terapeutico e sulle complessità delle interazioni tra tumore e sistema immunitario, e sottolineando al contempo la necessità di un'accurata modellazione tumorale in vivo.

Tessuto
Osso, tibia
Malattia
Osteosarcoma
Sinonimi
  • U-2 OS
  • U-2OS
  • U-2-OS
  • U2-OS
  • U20-S
  • U20S
  • 2T

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Cariotipo
(P11-46) da ipodiploide a quasi tetraploide, (P111-118) numeri modali da 34 a 37 e da 64 a 67 con anomalie che includono dicentri, rotture, anelli e polverizzazioni oltre a marcatori acrocentrici subtelocentrici e minuti

04Identificatori

Riferimento bibliografico
U2OS (numero di catalogo Cytion 300364)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0042

05Espressione e suscettibilità

Recettori espressi
Fattore di crescita insulino-simile I (IGF-I), fattore di crescita insulino-simile II (IGF-I), fattore di crescita derivato da osteosarcoma (ODGF)
Espressione dell'antigene
Gruppo sanguigno A, Rh+, HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
Isoenzimi
PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Prodotto di frequenza del fenotipo: 0.0082
Prodotti
Fattore di crescita derivato dall'osteosarcoma (ODGF)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
15 anni
Etnia
Caucasico