
- Tissue
- Osso, tíbia
- Disease
- Osteossarcoma
- Synonyms
- U-2 OS, U-2OS, U-2-OS, U2-OS, U20-S, U20S, 2T
Documents
U2OS
Cell line · Product number 300364
U2OS cells, an osteosarcoma cell line derived from a human osteosarcoma patient, play a significant role in cancer research, particularly in the study of ...
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01General information
- Description
As células U2OS, uma linhagem celular de osteossarcoma derivada de um paciente com osteossarcoma humano, desempenham um papel significativo na pesquisa sobre o câncer, particularmente no estudo do câncer ósseo. As células U2OS são amplamente utilizadas na pesquisa sobre o câncer, no desenvolvimento de medicamentos, em estudos de apoptose, na pesquisa genética e em estudos de oncologia radioterápica. O valor das células U2OS reside em sua aplicação na investigação da apoptose e da resistência a medicamentos, essencial para a criação de inibidores de moléculas pequenas e agentes terapêuticos semelhantes.
No âmbito da pesquisa clínica sobre o osteossarcoma, a linhagem celular U2OS é fundamental para examinar as respostas biológicas à radioterapia, enriquecendo assim nossa compreensão da biologia do osteossarcoma. Essas células também são essenciais na investigação de modificações da cromatina e seu impacto na biologia celular, especialmente no contexto da formação de tumores e da progressão do câncer.
A linhagem celular U2OS, também conhecida como linhagem celular OS, é reconhecida por sua capacidade de formação de tumores in vivo quando administrada por meio de injeções subcutâneas e intramusculares. Os tumores produzidos pelas células U2OS são caracterizados como sarcomas de alto grau e apresentam produção significativa de osteóide, o que é uma característica marcante do osteossarcoma. Além disso, esses tumores apresentaram infiltração por células imunes. A U2OS, portanto, serve como um modelo representativo para o estudo do osteossarcoma humano, suas interações com o sistema imunológico humano e a imunologia tumoral. Um dos desafios, no entanto, é garantir que a linhagem celular U2OS de osteossarcoma reflita com precisão os tumores in vivo, dada a variabilidade na capacidade de formação tumoral.
Em resumo, linhagens celulares de sarcoma, como a U2OS, servem como uma ferramenta fundamental para a compreensão do osteossarcoma, oferecendo insights valiosos sobre a biologia do câncer, o desenvolvimento terapêutico e as complexidades das interações entre o tumor e o sistema imunológico, ao mesmo tempo em que destacam a necessidade de modelagem tumoral in vivo precisa.
- Tissue
- Osso, tíbia
- Disease
- Osteossarcoma
- Synonyms
- U-2 OS
- U-2OS
- U-2-OS
- U2-OS
- U20-S
- U20S
- 2T
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- De tipo epitelial
- Karyotype
- (P11-46) hipodiplóide a quase tetraplóide; (P111-118) números modais de 34 a 37 e de 64 a 67, com anomalias que incluem dicêntricos, quebras, anéis e pulverizações, além de marcadores acrocentricos, subtelocêntricos e minúsculos
04Identifiers
- Citation
- U2OS (número de catálogo da Cytion 300364)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0042
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- Fator de crescimento semelhante à insulina I (IGF-I), fator de crescimento semelhante à insulina II (IGF-II), fator de crescimento derivado do osteossarcoma (ODGF)
- Antigen expression
- Tipo sanguíneo A, Rh+, HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
- Isoenzymes
- PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Produto da frequência fenotípica: 0,0082
- Products
- Fator de crescimento derivado do osteossarcoma (ODGF)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.
- Supplements
- Adicione 10% de FBS ao meio
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Seeding density
- 1 x 104 células/cm²
- Fluid renewal
- 2 a 3 vezes por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.
- Freeze medium
- Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
- Storage conditions
Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.
- Shipping conditions
As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.
08Donor
- Donor age
- 15 anos
- Ethnicity
- caucasiano
09Legal and safety
- Safety precautions
- Ao planejar o armazenamento de um criotubo em nitrogênio líquido para descongelamento futuro, é obrigatório seguir medidas de segurança rigorosas. É essencial o uso de luvas e roupas de proteção adequadas, além do uso obrigatório de máscara facial ou óculos de proteção durante a transferência de amostras congeladas para dentro ou para fora do tanque de nitrogênio líquido. Isso visa mitigar o risco de ferimentos decorrentes de possíveis explosões dos criotubos durante a remoção, o que pode resultar na projeção de fragmentos pontiagudos.
- Warranty
Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.
Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.
- Material Transfer Agreement required
- Yes