Ga naar de inhoud
2427T Cellen
Weefsel
Long
Ziekte
Longsquameus celcarcinoom

Documenten

2427T Cellen

Cell line · Productnummer 300167

2427T, afkomstig van een primaire tumor bij een 64-jarige blanke vrouwelijke patiënt bij wie plaveiselcelcarcinoom van de long was vastgesteld, biedt een waardevolle in vitro...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Afkomstig van een primaire tumor van een 64-jarige blanke vrouwelijke patiënt met de diagnose plaveiselcelcarcinoom in de longen, biedt 2427T een waardevol in vitro model dat de morfologische kenmerken van het oorspronkelijke tumorweefsel nabootst. Gekenmerkt door hun kenmerkende kleine, ronde vorm en neiging tot aggregatie in clusters, vertonen 2427T cellen belangrijke morfologische kenmerken die typisch zijn voor plaveiselcelcarcinoom (SCC).

Een bepalend kenmerk van de 2427T cellijn is de expressie van cytokeratine 5/6 (CK5/6), een marker die wijst op de SCC oorsprong. De heterogene expressie van CK5/6 duidt op de aanwezigheid van diverse celsubpopulaties binnen de 2427T-kweek, wat een mogelijkheid biedt voor verder onderzoek naar intratumorale heterogeniteit.

Immunofenotypering van 2427T heeft zijn unieke profiel onthuld, inclusief het ontbreken van adenocarcinoom-geassocieerde marker CK7, hemato-endotheliale progenitor marker CD34 en leukocyten marker CD45, wat de classificatie binnen het squameuze geslacht versterkt. Interessant is dat, terwijl de cellijn over het algemeen negativiteit vertoont voor neuroendocriene markers zoals CD56, synaptofysine (SYP), neuron-specifieke enolase (NSE) en chromogranine A (CHGA), de expressie van SYP in een subset van cellen een zekere mate van neuroendocriene marker heterogeniteit suggereert.

Cruciaal is dat de 2427T cellijn geen mutaties in EGF-R of k-ras bevat, waardoor deze zich onderscheidt van andere modellen en zijn potentieel onderstreept als een nieuwe bron voor onderzoek naar de biologie en therapeutische kwetsbaarheden van plaveiselcel niet-kleincellige longkanker (NSCLC). Door de afwezigheid van veel voorkomende oncogene mutaties is 2427T van onschatbare waarde voor onderzoek gericht op het blootleggen van de onderliggende mechanismen van de pathogenese en progressie van plaveiselcelcarcinoom.

Weefsel
Long
Ziekte
Longsquameus celcarcinoom

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Zeer tumorigeen in naakte muizen.

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
2427T (Cytion catalogusnummer 300167)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_M070

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Synaptofysine (SYP)
Antigeenexpressie
Gedeeltelijke expressie van CK5/6

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 50% basaal medium + 40% FBS + 10% DMSO, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en cryogeïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
64 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch