Gå til innholdet
2427T Celler
Vev
Lunge
Sykdom
Plateepitelkarsinom i lungene

Dokumenter

2427T Celler

Cell line · Produktnummer 300167

2427T stammer fra en primærtumor hos en 64 år gammel kvinnelig pasient av kaukasisk opprinnelse som er diagnostisert med plateepitelkarsinom i lungen, og gir et verdifullt in vitro...

€550.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

2427T stammer fra en primærsvulst fra en 64 år gammel kaukasisk kvinne som ble diagnostisert med plateepitelkarsinom i lungene. 2427T er en verdifull in vitro-modell som rekapitulerer de morfologiske trekkene i det opprinnelige svulstvevet. 2427T-cellene har en karakteristisk liten, rund form og en tendens til å samle seg i klynger, og de har viktige morfologiske trekk som er typiske for plateepitelkarsinom (SCC).

Et karakteristisk kjennetegn ved 2427T-cellelinjen er uttrykket av cytokeratin 5/6 (CK5/6), en markør som indikerer at den har sitt opphav i SCC. Det heterogene uttrykket av CK5/6 tyder på at det finnes ulike subpopulasjoner av celler i 2427T-kulturen, noe som gir mulighet for videre utforskning av intratumoral heterogenitet.

Immunfenotyping av 2427T har avdekket en unik profil, inkludert mangel på den adenokarsinom-assosierte markøren CK7, den hemato-endoteliale progenitormarkøren CD34 og leukocyttmarkøren CD45, noe som styrker klassifiseringen av den innenfor den plateepiteløse linjen. Det er interessant å merke seg at selv om cellelinjen generelt er negativ for nevroendokrine markører som CD56, synaptofysin (SYP), nevronspesifikk enolase (NSE) og kromogranin A (CHGA), tyder uttrykket av SYP i en undergruppe av celler på en viss grad av heterogenitet i nevroendokrine markører.

Det er avgjørende at 2427T-cellelinjen ikke har mutasjoner i EGF-R eller k-ras, noe som skiller den fra andre modeller og understreker dens potensial som en ny ressurs for å undersøke biologien og de terapeutiske sårbarhetene ved ikke-småcellet lungekreft med plateepitelcancer (NSCLC). Fraværet av vanlige onkogene mutasjoner gjør 2427T til et uvurderlig verktøy for forskning som tar sikte på å avdekke de underliggende mekanismene for patogenesen og utviklingen av plateepitelkarsinom.

Vev
Lunge
Sykdom
Plateepitelkarsinom i lungene

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger

03Egenskaper

Tumorinduserende
Sterkt tumorfremkallende i nakne mus.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
2427T (Cytion-katalognummer 300167)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_M070

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Synaptofysin (SYP)
Antigenuttrykk
Delvis uttrykk av CK5/6

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi 50 % basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
64 år
Etnisitet
Kaukasisk