Siirry sisältöön
2427T Kennot
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen okasolusyöpä

Asiakirjat

2427T Kennot

Cell line · Tuotenumero 300167

2427T on peräisin 64-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan primaarikasvaimesta, jolla on diagnosoitu keuhkojen levyepiteelikarsinooma, ja se tarjoaa arvokkaan in vitro...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

2427T on peräisin 64-vuotiaan valkoihoisen naisen primaarikasvaimesta, jolla oli diagnosoitu keuhkojen levyepiteelisolusyöpä, ja se on arvokas in vitro -malli, joka toistaa alkuperäisen kasvainkudoksen morfologiset piirteet. 2427T:n soluille on ominaista niiden pieni, pyöreä muoto ja taipumus kasautua klustereiksi, ja niillä on keskeisiä levyepiteelikarsinoomalle (SCC) tyypillisiä morfologisia piirteitä.

2427T-solulinjan tunnusmerkkinä on sytokeratiini 5/6:n (CK5/6) ilmentyminen, joka on SCC-alkuperää osoittava merkkiaine. CK5/6:n heterogeeninen ilmentyminen viittaa siihen, että 2427T-viljelmässä on erilaisia solujen osapopulaatioita, mikä tarjoaa mahdollisuuden tutkia edelleen solunsisäistä heterogeenisuutta.

2427T:n immunofenotyypin määritys on paljastanut sen ainutlaatuisen profiilin, mukaan lukien adenokarsinoomaan liittyvän CK7-markkerin, hemato-endoteeliproduktiomarkkerin CD34 ja leukosyyttien CD45-markkerin puuttumisen, mikä vahvistaa sen luokittelua levyepiteelilinjaan. Mielenkiintoista on, että vaikka solulinja osoittaa yleensä negatiivisuutta neuroendokriinisten merkkiaineiden, kuten CD56:n, synaptofysiinin (SYP), neuronispesifisen enolaasin (NSE) ja kromograniini A:n (CHGA) suhteen, SYP:n ilmentyminen osassa soluja viittaa jonkinasteiseen neuroendokriinisten merkkiaineiden heterogeenisuuteen.

Ratkaisevaa on, että 2427T-solulinjassa ei ole EGF-R- tai k-ras-mutaatioita, mikä erottaa sen muista malleista ja korostaa sen potentiaalia uutena resurssina, jonka avulla voidaan tutkia ei-pienisoluisen okasolusyövän (NSCLC) biologiaa ja terapeuttisia haavoittuvuuksia. Yleisten onkogeenisten mutaatioiden puuttuminen tekee 2427T:stä korvaamattoman arvokkaan välineen tutkimukseen, jolla pyritään paljastamaan levyepiteelisolusyövän patogeneesin ja etenemisen taustalla olevia mekanismeja.

Kudos
Keuhkot
Sairaus
Keuhkojen okasolusyöpä

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt

03Ominaisuudet

Kasvaimia aiheuttava
Erittäin tumorigeeninen nude-hiirissä.

04Tunnisteet

Lähdeviite
2427T (Cytionin luettelonumero 300167)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_M070

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Synaptofysiini (SYP)
Antigeenin ilmentyminen
CK5/6:n osittainen ilmentyminen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme 50 % perusmediaa + 40 % FBS + 10 % DMSO:ta eli CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytysstressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
64 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen