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2427T Celle
Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma polmonare a cellule squamose

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2427T Celle

Cell line · Codice prodotto 300167

Derivato da un tumore primario di una paziente caucasica di 64 anni a cui era stato diagnosticato un carcinoma polmonare a cellule squamose, il ceppo 2427T offre un prezioso modello in vitro...

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01Informazioni generali

Descrizione

Proveniente da un tumore primario di una paziente caucasica di 64 anni con diagnosi di carcinoma polmonare a cellule squamose, il 2427T rappresenta un prezioso modello in vitro che riproduce le caratteristiche morfologiche del tessuto tumorale originale. Caratterizzate dalla caratteristica forma piccola e rotonda e dalla propensione ad aggregarsi in gruppi, le cellule 2427T presentano caratteristiche morfologiche chiave tipiche del carcinoma a cellule squamose (SCC).

Una caratteristica distintiva della linea cellulare 2427T è l'espressione della citocheratina 5/6 (CK5/6), un marcatore indicativo della sua origine SCC. L'espressione eterogenea di CK5/6 indica la presenza di diverse sottopopolazioni cellulari all'interno della coltura 2427T, offrendo l'opportunità di esplorare ulteriormente l'eterogeneità intratumorale.

L'immunofenotipizzazione della 2427T ha rivelato il suo profilo unico, tra cui la mancanza del marcatore CK7 associato all'adenocarcinoma, del marcatore CD34 dei progenitori emato-endoteliali e del marcatore CD45 dei leucociti, rafforzando la sua classificazione nel lignaggio squamoso. È interessante notare che, mentre la linea cellulare mostra generalmente negatività per i marcatori neuroendocrini come CD56, sinaptofisina (SYP), enolasi neurone-specifica (NSE) e cromogranina A (CHGA), l'espressione di SYP in un sottogruppo di cellule suggerisce un certo grado di eterogeneità dei marcatori neuroendocrini.

La linea cellulare 2427T non ospita mutazioni in EGF-R o k-ras, il che la distingue da altri modelli e ne sottolinea il potenziale come nuova risorsa per approfondire la biologia e le vulnerabilità terapeutiche del carcinoma polmonare non a piccole cellule a cellule squamose (NSCLC). L'assenza di mutazioni oncogeniche comuni rende il 2427T uno strumento prezioso per la ricerca volta a scoprire i meccanismi alla base della patogenesi e della progressione del carcinoma a cellule squamose.

Tessuto
Polmone
Malattia
Carcinoma polmonare a cellule squamose

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente

03Caratteristiche

Tumorigenico
Altamente tumorigenico in topi nudi.

04Identificatori

Riferimento bibliografico
2427T (numero di catalogo Cytion 300167)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_M070

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Sinaptofisina (SYP)
Espressione dell'antigene
Espressione parziale di CK5/6

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
64 anni
Etnia
Caucasico