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2427T-Zellen
Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Lunge

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2427T-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300167

Die Zelllinie 2427T stammt von einem Primärtumor einer 64-jährigen kaukasischen Patientin, bei der ein Plattenepithelkarzinom der Lunge diagnostiziert wurde, und bietet ein wertvolles In-vitro-Modell...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

2427T stammt aus dem Primärtumor einer 64-jährigen kaukasischen Patientin, bei der ein Plattenepithelkarzinom der Lunge diagnostiziert wurde, und stellt ein wertvolles In-vitro-Modell dar, das die morphologischen Merkmale des ursprünglichen Tumorgewebes rekapituliert. Die 2427T-Zellen zeichnen sich durch ihre charakteristische kleine, runde Form und ihre Neigung zur Aggregation in Clustern aus und weisen die für Plattenepithelkarzinome (SCC) typischen morphologischen Merkmale auf.

Ein charakteristisches Merkmal der 2427T-Zelllinie ist die Expression von Cytokeratin 5/6 (CK5/6), einem Marker, der auf den Ursprung des SCC hinweist. Die heterogene Expression von CK5/6 deutet auf das Vorhandensein verschiedener Zellsubpopulationen innerhalb der 2427T-Kultur hin und bietet die Möglichkeit, die intratumorale Heterogenität weiter zu untersuchen.

Die Immunphänotypisierung von 2427T hat ihr einzigartiges Profil offenbart, einschließlich des Fehlens des Adenokarzinom-assoziierten Markers CK7, des hämato-endothelialen Vorläufer-Markers CD34 und des Leukozyten-Markers CD45, was ihre Einordnung in die Plattenepithel-Linie untermauert. Interessanterweise ist die Zelllinie zwar generell negativ für neuroendokrine Marker wie CD56, Synaptophysin (SYP), neuronenspezifische Enolase (NSE) und Chromogranin A (CHGA), doch die Expression von SYP in einer Untergruppe von Zellen lässt auf eine gewisse Heterogenität der neuroendokrinen Marker schließen.

Entscheidend ist, dass die 2427T-Zelllinie keine EGF-R- oder k-ras-Mutationen aufweist, was sie von anderen Modellen unterscheidet und ihr Potenzial als neue Ressource für die Erforschung der Biologie und der therapeutischen Schwachstellen des nicht-kleinzelligen Plattenepithelkarzinoms (NSCLC) unterstreicht. Das Fehlen üblicher onkogener Mutationen macht 2427T zu einem unschätzbaren Werkzeug für die Forschung, die darauf abzielt, die zugrunde liegenden Mechanismen der Pathogenese und des Fortschreitens von Plattenepithelkarzinomen aufzudecken.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom der Lunge

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger

03Merkmale

Tumorauslösend
Hochgradig tumorerzeugend in Nacktmäusen.

04Bezeichner

Quellenangabe
2427T (Cytion Katalognummer 300167)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_M070

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Synaptophysin (SYP)
Antigenexpression
Partielle Expression von CK5/6

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 50 % Basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektiva und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und den kryoinduzierten Stress zu verringern.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
64 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch