Prejsť na obsah
2427T bunky
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Spinocelulárny karcinóm pľúc

Dokumenty

2427T bunky

Cell line · Číslo výrobku 300167

Vzorka 2427T, pochádzajúca z primárneho nádoru 64-ročnej pacientky kaukazského pôvodu s diagnózou skvamocelulárneho karcinómu pľúc, poskytuje cenné in vitro...

€550.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Prístroj 2427T, ktorý pochádza z primárneho nádoru 64-ročnej pacientky kaukazského pôvodu s diagnózou skvamocelulárneho karcinómu pľúc, predstavuje cenný in vitro model, ktorý kopíruje morfologické znaky pôvodného nádorového tkaniva. Bunky 2427T, ktoré sa vyznačujú charakteristickým malým, okrúhlym tvarom a sklonom k zhlukovaniu do zhlukov, vykazujú kľúčové morfologické znaky typické pre skvamocelulárny karcinóm (SCC).

Charakteristickým znakom bunkovej línie 2427T je expresia cytokeratínu 5/6 (CK5/6), markera, ktorý poukazuje na pôvod SCC. Heterogénna expresia CK5/6 naznačuje prítomnosť rôznych subpopulácií buniek v kultúre 2427T, čo predstavuje príležitosť na ďalšie skúmanie intratumorálnej heterogenity.

Imunofenotypizácia 2427T odhalila jeho jedinečný profil vrátane absencie markera CK7 spojeného s adenokarcinómom, markera hemato-endotelových progenitorov CD34 a markera leukocytov CD45, čo posilňuje jeho zaradenie do skvamóznej línie. Zaujímavé je, že zatiaľ čo bunková línia vo všeobecnosti vykazuje negativitu neuroendokrinných markerov, ako sú CD56, synaptofyzín (SYP), neuron-špecifická enoláza (NSE) a chromogranín A (CHGA), expresia SYP v podskupine buniek naznačuje určitý stupeň heterogenity neuroendokrinných markerov.

Dôležité je, že bunková línia 2427T neobsahuje mutácie EGF-R alebo k-ras, čím sa odlišuje od iných modelov a zdôrazňuje svoj potenciál ako nový zdroj na skúmanie biológie a terapeutickej zraniteľnosti skvamocelulárneho nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC). Táto absencia bežných onkogénnych mutácií stavia 2427T do pozície neoceniteľného nástroja pre výskum zameraný na odhalenie základných mechanizmov patogenézy a progresie skvamocelulárneho karcinómu.

Tkanivo
Pľúca
Choroba
Spinocelulárny karcinóm pľúc

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec

03Charakteristiky

Tumorigenický
Vysoko tumorigénny u nahých myší.

04Identifikátory

Citácia
2427T (katalógové číslo Cytion 300167)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_M070

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Synaptofyzín (SYP)
Expresia antigénu
Čiastočná expresia CK5/6

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame 50 % bazálne médium + 40 % FBS + 10 % DMSO alebo CM-1 (katalógové číslo Cytion 800100), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie regenerácie a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
64 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský