2427T rakud

2427T, mis pärineb 64-aastase naissoost kaukaasia patsiendi primaarsest kasvajast, kellel oli diagnoositud kopsukelmekartsinoom, on väärtuslik in vitro mudel, mis taastab algse kasvajakoe morfoloogilisi tunnuseid. 2427T rakke iseloomustab nende iseloomulik väike, ümmargune kuju ja kalduvus koonduda klastriteks, ning neil on peamised morfoloogilised tunnused, mis on iseloomulikud koldekartsinoomile (SCC).

Rakuliini 2427T iseloomulikuks tunnuseks on tsütokeratiin 5/6 (CK5/6) ekspressioon, mis on SCC päritolule viitav marker. CK5/6 heterogeenne ekspressioon viitab erinevate raku subpopulatsioonide olemasolule 2427T kultuuris, mis annab võimaluse intratumoraalse heterogeensuse edasiseks uurimiseks.

2427T immunofenotüpiseerimine näitas selle unikaalset profiili, sealhulgas adenokartsinoomiga seotud markeri CK7, hematoendoteliaalse progenitaatorimarkeri CD34 ja leukotsüütide markeri CD45 puudumist, mis kinnitab selle liigitamist skamoosse liini hulka. Huvitav on see, et kuigi rakuliinil on üldiselt negatiivne neuroendokriinsete markerite, nagu CD56, sünaptofüsiin (SYP), neuronispetsiifiline enolaas (NSE) ja kromograniin A (CHGA), ekspressioon, mis esineb teatud rakkude alamhulgas, viitab neuroendokriinsete markerite teatavale heterogeensusele.

Oluline on see, et rakuliinil 2427T ei ole EGF-R või k-ras mutatsioone, mis eristab seda teistest mudelitest ja rõhutab selle potentsiaali uudse ressursina mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) bioloogia ja terapeutilise haavatavuse uurimisel. See, et 2427T ei ole levinud onkogeenseid mutatsioone, muudab selle hindamatuks uurimisvahendiks, mille eesmärk on avastada lapikrakulise kartsinoomi patogeneesi ja progresseerumise aluseks olevaid mehhanisme.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest