Ga naar de inhoud
PC-9
Weefsel
Long
Ziekte
Longadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Lymfeklier
Synoniemen
PC9, PC-9/S1, PC-9S1

Documenten

PC-9

Cell line · Productnummer 305045

De PC-9-cellijn is afkomstig van een humaan longadenocarcinoom, een subtype van niet-kleincellige longkanker (NSCLC). Deze cellijn valt met name op door...

€750.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De PC-9 cellijn is afgeleid van een humaan longadenocarcinoom, een subtype van niet-kleincellige longkanker (NSCLC). Deze cellijn is vooral bekend vanwege de aanwezigheid van een activerende mutatie in het EGFR-gen, met name de exon 19-deletie (E746_A750del), een veel voorkomende driver-mutatie in NSCLC. Deze mutatie maakt PC-9 tot een model van onschatbare waarde voor het bestuderen van de biologie van EGFR-gedreven kankers en het evalueren van de werkzaamheid van tyrosinekinaseremmers (TKI's) zoals gefitinib en erlotinib, die specifiek gericht zijn tegen deze pathway.

PC-9 cellen zijn uitgebreid gebruikt in onderzoek gericht op resistentiemechanismen tegen EGFR TKIs, met name het ontstaan van secundaire mutaties zoals T790M. Deze studies hebben geleid tot de ontwikkeling van remmers van de derde generatie, zoals osimertinib, die zowel de primaire EGFR-mutatie als resistentiegeassocieerde wijzigingen aanpakken. De cellijn is ook gevoelig voor andere remmers die zich richten op downstream signaalroutes, waaronder die betrokken zijn bij de PI3K/AKT en MAPK signaalcascades, wat het nut voor translationeel kankeronderzoek onderstreept.

Naast de genetische en farmacologische eigenschappen, is PC-9 opgenomen in high-throughput drug screening programma's, wat de identificatie van verbindingen met selectieve activiteit tegen EGFR-gemuteerd NSCLC vergemakkelijkt. Het goed gekarakteriseerde genomische landschap en consistente fenotypische gedrag in vitro van de lijn maken het een hoeksteen voor zowel fundamenteel als toegepast longkankeronderzoek, met name in de context van doelgerichte en combinatietherapie.

Weefsel
Long
Ziekte
Longadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Lymfeklier
Synoniemen
  • PC9
  • PC-9/S1
  • PC-9S1

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Heterogeen mengsel van ronde cellen en spoelvormige cellen
Tumorverwekkend
Ja

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
PC-9 (Cytion catalogusnummer 305045)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_B260

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verzamel de suspensiecellen in een buis van 15 ml en was de aanhangende cellen voorzichtig met PBS zonder calcium en magnesium (gebruik 3-5 ml voor T25-flesjes en 5-10 ml voor T75-flesjes). Breng Accutase aan (1-2 ml voor T25-flesjes, 2,5 ml voor T75-flesjes) en zorg dat de cellaag volledig bedekt wordt. Laat de cellen gedurende 10-15 minuten bij 37 °C incuberen. Combineer en centrifugeer na de incubatie zowel de suspensie als de aanhangende cellen. Na het centrifugeren de celpellet voorzichtig resuspenderen en de celsuspensie overbrengen in nieuwe kolven met vers medium.
Vloeistofverversing
1 tot 2 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
45 jaar