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PC-9
Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma polmonare
Sito metastatico
Linfonodo
Sinonimi
PC9, PC-9/S1, PC-9S1

Documenti

PC-9

Cell line · Codice prodotto 305045

La linea cellulare PC-9 deriva da un adenocarcinoma polmonare umano, un sottotipo di carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC). Questa linea cellulare si distingue in particolare per...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare PC-9 deriva da un adenocarcinoma polmonare umano, un sottotipo di tumore polmonare non a piccole cellule (NSCLC). Questa linea cellulare si distingue in particolare per la presenza di una mutazione attivante nel gene EGFR, in particolare la delezione dell'esone 19 (E746_A750del), che è una mutazione driver comune nel NSCLC. Questa alterazione rende le PC-9 un modello prezioso per lo studio della biologia dei tumori guidati dall'EGFR e per la valutazione dell'efficacia degli inibitori della tirosin-chinasi (TKI) come il gefitinib e l'erlotinib, che colpiscono specificamente questa via.

Le cellule PC-9 sono state ampiamente utilizzate nella ricerca sui meccanismi di resistenza ai TKI dell'EGFR, in particolare sulla comparsa di mutazioni secondarie come la T790M. Questi studi hanno permesso di sviluppare inibitori di terza generazione come osimertinib, che hanno come bersaglio sia la mutazione primaria dell'EGFR sia le alterazioni associate alla resistenza. La linea cellulare mostra anche sensibilità ad altri inibitori che mirano alle vie di segnalazione a valle, comprese quelle coinvolte nelle cascate di segnalazione PI3K/AKT e MAPK, sottolineando la sua utilità nella ricerca traslazionale sul cancro.

Oltre alle sue caratteristiche genetiche e farmacologiche, il PC-9 è stato inserito in programmi di screening farmacologico ad alto rendimento, facilitando l'identificazione di composti con attività selettiva contro il NSCLC mutato con EGFR. Il paesaggio genomico ben caratterizzato della linea e il comportamento fenotipico coerente in vitro ne fanno una pietra miliare per la ricerca di base e applicata sul cancro del polmone, in particolare nel contesto della terapia mirata e di combinazione.

Tessuto
Polmone
Malattia
Adenocarcinoma polmonare
Sito metastatico
Linfonodo
Sinonimi
  • PC9
  • PC-9/S1
  • PC-9S1

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Miscela eterogenea di cellule rotonde e cellule a forma di fuso
Tumorigenico
Sì

04Identificatori

Riferimento bibliografico
PC-9 (numero di catalogo Cytion 305045)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B260

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a 37°C per 10-15 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 1 a 2 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
45 anni