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PC-9
Tecido
Pulmão
Doença
Adenocarcinoma do pulmão
Local da metástase
Nódulo linfático
Sinónimos
PC9, PC-9/S1, PC-9S1

Documentos

PC-9

Cell line · Número do produto 305045

A linha celular PC-9 é derivada de um adenocarcinoma pulmonar humano, um subtipo de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC). Esta linha celular destaca-se particularmente por...

€750.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular PC-9 é derivada de um adenocarcinoma do pulmão humano, um subtipo de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC). Esta linha celular é particularmente notável por albergar uma mutação de ativação no gene EGFR, especificamente a deleção do exão 19 (E746_A750del), que é uma mutação comum em NSCLC. Esta alteração faz da PC-9 um modelo inestimável para o estudo da biologia dos cancros impulsionados pelo EGFR e para a avaliação da eficácia dos inibidores da tirosina quinase (TKI), como o gefitinib e o erlotinib, que visam especificamente esta via.

As células PC-9 têm sido amplamente utilizadas em investigação centrada nos mecanismos de resistência aos TKI do EGFR, em especial o aparecimento de mutações secundárias como a T790M. Estes estudos contribuíram para o desenvolvimento de inibidores de terceira geração, como o osimertinib, que têm como alvo tanto a mutação primária do EGFR como as alterações associadas à resistência. A linha celular também apresenta sensibilidade a outros inibidores que visam as vias de sinalização a jusante, incluindo as envolvidas nas cascatas de sinalização PI3K/AKT e MAPK, o que sublinha a sua utilidade na investigação translacional do cancro.

Para além dos seus atributos genéticos e farmacológicos, a PC-9 foi incorporada em programas de rastreio de medicamentos de elevado rendimento, facilitando a identificação de compostos com atividade selectiva contra o CPNPC com mutações EGFR. A paisagem genómica bem caracterizada da linha e o seu comportamento fenotípico consistente in vitro fazem dela uma pedra angular para a investigação básica e aplicada do cancro do pulmão, em particular no contexto da terapia orientada e combinada.

Tecido
Pulmão
Doença
Adenocarcinoma do pulmão
Local da metástase
Nódulo linfático
Sinónimos
  • PC9
  • PC-9/S1
  • PC-9S1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Mistura heterogénea de células redondas e células fusiformes
Tumorigénico
Sim

04Identificadores

Referência
PC-9 (número de catálogo da Cytion 305045)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_B260

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar a 37°C durante 10-15 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
Renovação de fluidos
1 a 2 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
45 anos