Pāriet uz saturu
PC-9
Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
PC9, PC-9/S1, PC-9S1

Dokumenti

PC-9

Cell line · Preces numurs 305045

Šūnu līnija PC-9 ir iegūta no cilvēka plaušu adenokarcinomas, kas ir nesīkšūnu plaušu vēža (NSCLC) apakštips. Šī šūnu līnija ir īpaši ievērojama ar...

€750.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

PC-9 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka plaušu adenokarcinomas, kas ir nesmalto šūnu plaušu vēža (NSCLC) apakštips. Šī šūnu līnija īpaši izceļas ar to, ka tai ir aktivizējoša EGFR gēna mutācija, jo īpaši 19. eksona delecija (E746_A750del), kas ir izplatīta NSCLC ierosinātāja mutācija. Šī izmaiņa padara PC-9 par nenovērtējamu modeli EGFR vadīta vēža bioloģijas izpētei un tādu tirozīnkināzes inhibitoru (TKI) efektivitātes novērtēšanai kā gefitinibs un erlotinibs, kas ir īpaši vērsti pret šo ceļu.

PC-9 šūnas ir plaši izmantotas pētījumos, kas vērsti uz rezistences mehānismiem pret EGFR TKI, jo īpaši sekundāro mutāciju, piemēram, T790M, rašanos. Šie pētījumi ir bijuši par pamatu trešās paaudzes inhibitoru, piemēram, osimertinibu, kas ir vērsti gan pret primāro EGFR mutāciju, gan pret rezistences izraisītām izmaiņām, izstrādei. Šūnu līnija ir jutīga arī pret citiem inhibitoriem, kas iedarbojas uz pakārtotajiem signālu ceļiem, tostarp PI3K/AKT un MAPK signālu kaskādēs iesaistītajiem, tādējādi uzsverot tās lietderību vēža pētījumos.

Papildus savām ģenētiskajām un farmakoloģiskajām īpašībām PC-9 ir iekļauts augstas izšķirtspējas zāļu skrīninga programmās, veicinot savienojumu ar selektīvu iedarbību pret EGFR mutētu NSCLC identificēšanu. Šīs līnijas labi raksturotā genoma ainava un konsekventā fenotipiskā uzvedība in vitro padara to par stūrakmeni gan fundamentālajiem, gan lietišķajiem plaušu vēža pētījumiem, jo īpaši mērķterapijas un kombinētās terapijas kontekstā.

Audums
Plaušas
Slimība
Plaušu adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
  • PC9
  • PC-9/S1
  • PC-9S1

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Heterogēns apaļu šūnu un vārpstas formas šūnu maisījums
Tumorogēns
Jā

04Identifikatori

Atsauce
PC-9 (Cytion kataloga numurs 305045)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_B260

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties 37 °C temperatūrā 10-15 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Šķidruma atjaunošana
1 līdz 2 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
45 gadi