Mine otse sisu juurde
PC-9
Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
PC9, PC-9/S1, PC-9S1

Dokumendid

PC-9

Cell line · Toote number 305045

PC-9 rakuliin on saadud inimese kopsu adenokartsinoomist, mis on mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) alatüüp. See rakuliin on eriti märkimisväärne seetõttu, et...

€750.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

PC-9 rakuliin on saadud inimese kopsu adenokartsinoomist, mis on mitteväikerakk-kopsuvähi alatüüp. See rakuliin on eriti tähelepanuväärne selle poolest, et sellel on EGFR-geeni aktiveeriv mutatsioon, täpsemalt 19. eksoni deletioon (E746_A750del), mis on NSCLC puhul tavaline juhtmutatsioon. See muudatus muudab PC-9 hindamatuks mudeliks EGFR-juhitava vähi bioloogia uurimiseks ja selliste türosiinkinaasi inhibiitorite (TKI) nagu gefitiniib ja erlotiniib, mis on spetsiaalselt suunatud sellele ahelale, tõhususe hindamiseks.

PC-9 rakke on laialdaselt kasutatud EGFR TKI-de suhtes resistentsuse mehhanismide, eelkõige selliste sekundaarsete mutatsioonide nagu T790M tekkimise uurimisel. Nende uuringute põhjal on välja töötatud kolmanda põlvkonna inhibiitorid, nagu osimertiniib, mis on suunatud nii EGFR-i esmase mutatsiooni kui ka resistentsusega seotud muutuste vastu. Rakuliin on tundlik ka teiste inhibiitorite suhtes, mis on suunatud allavoolu signaaliradadele, sealhulgas PI3K/AKT ja MAPK signaalkaskaadides osalevatele inhibiitoritele, mis rõhutab selle kasulikkust translatsioonilistes vähiuuringutes.

Lisaks oma geneetilistele ja farmakoloogilistele omadustele on PC-9 lülitatud kõrge läbilaskevõimega ravimite sõelumisprogrammidesse, mis hõlbustab EGFR-mutatsiooniga NSCLC suhtes selektiivse toimega ühendite tuvastamist. Selle liini hästi iseloomustatud genoomiline maastik ja järjepidev fenotüüpiline käitumine in vitro muudavad selle nii põhi- kui ka rakenduslike kopsuvähiuuringute nurgakiviks, eriti siht- ja kombinatsiooniteraapia kontekstis.

Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Lümfisõlm
Sünonüümid
  • PC9
  • PC-9/S1
  • PC-9S1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Ümarate rakkude ja spindlikujuliste rakkude heterogeenne segu
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
PC-9 (Cytioni katalooginumber 305045)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_B260

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel inkubeerida 37 °C juures 10-15 minutit. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Vedeliku vahetus
1 kuni 2 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
45 aastat