Ga naar de inhoud
Human Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord - Artery
Weefsel
Navelstreng - Slagader

Documenten

Human Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord - Artery

Cell line · Productnummer 300648

Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) derived from the umbilical cord artery are a distinct and promising subtype of mesenchymal stem cells, offering sever...

€690.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op bestelling gemaakt
1

01Algemene informatie

Beschrijving

Menselijke mesenchymale stamcellen (hMSC's) afkomstig uit de navelstrengslagader zijn een veelbelovend subtype mesenchymale stamcellen en bieden een aantal unieke voordelen ten opzichte van andere MSC bronnen. In tegenstelling tot MSCs uit beenmerg of vetweefsel, worden MSCs uit de navelstreng geoogst uit een primitievere en minder invasieve bron, waardoor ze een jongere en potentieel krachtigere celpopulatie hebben. Deze oorsprong zorgt voor een hoger proliferatievermogen en langere telomeren, wat hun zelfvernieuwend vermogen kan vergroten en het risico op senescentie tijdens langdurige kweek kan verkleinen. Bovendien brengen MSCs uit de navelstreng meestal een unieke set oppervlaktemarkers tot expressie en hebben ze een lager immunogeen profiel, waardoor ze bijzonder geschikt zijn voor allogene toepassingen en het risico op afstoting door het immuunsysteem kleiner is.

In vitro laten uit de navelstreng afkomstige MSC's een robuuste multipotentie zien, met het vermogen om te differentiëren in adipocyten, osteoblasten en chondrocyten wanneer ze worden blootgesteld aan specifieke differentiatiemedia. Deze veelzijdigheid is vergelijkbaar met die van MSCs afkomstig van andere weefsels, maar met het extra voordeel van hun primitieve aard, wat hun therapeutische potentieel kan vergroten. Elke batch van deze MSCs ondergaat een strenge kwaliteitscontrole, waaronder beoordelingen voor levensvatbaarheid, zuiverheid en werkzaamheid, om ervoor te zorgen dat de cellen voldoen aan hoge standaarden voor onderzoekstoepassingen. De cellen worden in een vroeg stadium gecryopreserveerd met behulp van een gespecialiseerd cryomedium, waardoor hun hoge levensvatbaarheid (92% tot 95%) behouden blijft na ontdooien, wat cruciaal is voor hun effectieve gebruik in downstreamtoepassingen.

In het algemeen bieden hMSC's uit de navelstrengader een combinatie van gemakkelijke toegankelijkheid, hoge proliferatieve capaciteit en lage immunogeniciteit, waardoor ze een waardevol hulpmiddel zijn voor een breed scala aan onderzoeken, met name die gericht zijn op regeneratieve geneeskunde en immuunmodulatie. Deze cellen, geoogst met volledige toestemming van de donor, vormen een hoogwaardige en ethisch verantwoorde optie voor onderzoekers die het volledige potentieel van mesenchymale stamcellen in vitro willen onderzoeken.

Weefsel
Navelstreng - Slagader
Toepassingen
Medicijntesten, regeneratieve geneeskunde, ziekteonderzoek

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Niet gespecificeerd
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Goed verspreide spilvormige, fibroblast-achtige morfologie gedurende ten minste 5 passages. Minder dan 2% cellen vertonen een spontane myofibroblast-achtige morfologie binnen elke passage.
Celtype
Stamcellen

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
Menselijke Mesenchymale Stamcellen, Navelstreng - Slagader (Cytion catalogusnummer 300648)
NCBI-belastingnummer
9606

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
Een uitgebreid panel van markers, waaronder CD73/CD90/CD105 (positief) en CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatief), wordt gebruikt in flowcytometrieanalyse om gekweekte MSCs (P2-P3) te identificeren voorafgaand aan cryopreservatie. Deze markers worden aanbevolen door de ISCT MSC-commissie.
Virussen
De donor is negatief voor HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) en HIV-1/2 (IFA). De cellen zijn negatief voor HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum en Ureaplasma parvum.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w/o: Ribonucleosiden, w/o: Deoxyribonucleosiden, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 2,2g/L NaHCO3
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Dissociatiereagens
Trypsine-EDTA
Heruitplanten
Voor routinematige adherente celkweek: Zuig het oude kweekmedium van de adherente cellen af en was ze met PBS om eventueel achtergebleven medium te verwijderen. Voeg na het opzuigen van de PBS het juiste volume trypsine/EDTA-oplossing toe op basis van de grootte van het kweekvat (bijv. 1 ml voor een T25-kolf, 3 ml voor een T75-kolf) en incubeer bij kamertemperatuur of 37 °C totdat de cellen loskomen (5-10 minuten). Controleer de onthechting onder een microscoop en tik zo nodig voorzichtig op het vat om de cellen los te maken. Voeg na het losmaken volledig medium toe om de trypsine/EDTA te inactiveren, resuspendeer de cellen voorzichtig en breng een aliquot van de celsuspensie over in een nieuw kweekvat met vers medium. Plaats het kweekvat in een incubator die is ingesteld op 37°C met 5%CO2 en ververs het medium elke 2-3 dagen.
Zaaidichtheid
1 tot 3 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
Eerst vochtverversing na 24 uur, daarna om de 2 tot 3 dagen.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we 80% FBS + 10% basaalmedium + 10% DMSO om de levensvatbaarheid te behouden, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100) voor superieure cryoprotectie, waarbij ongewenste differentiatie wordt voorkomen terwijl de pluripotentie behouden blijft.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
Informeer bij ons
Etnische afkomst
Kaukasisch