Siirry sisältöön
Human Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord - Artery
Kudos
Napanuora - valtimo

Asiakirjat

Human Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord - Artery

Cell line · Tuotenumero 300648

Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) derived from the umbilical cord artery are a distinct and promising subtype of mesenchymal stem cells, offering sever...

€690.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Valmistetaan tilauksesta
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Napanuoran valtimosta peräisin olevat ihmisen mesenkymaaliset kantasolut (hMSC) ovat mesenkymaalisten kantasolujen erillinen ja lupaava alatyyppi, jolla on useita ainutlaatuisia etuja muihin MSC-lähteisiin verrattuna. Toisin kuin luuytimestä tai rasvakudoksesta saadut MSC:t, napanuoran valtimosta saadut MSC:t kerätään primitiivisemmästä ja vähemmän invasiivisesta lähteestä, mikä tarjoaa nuoremman ja potentiaalisesti tehokkaamman solupopulaation. Tämä alkuperä antaa suuremman proliferatiivisen kapasiteetin ja pidemmät telomeerit, mikä voi parantaa niiden itseuudistumiskykyä ja vähentää senesenssin riskiä pitkäaikaisessa viljelyssä. Lisäksi napanuoran valtimosta peräisin olevat MSC-solut ilmentävät tyypillisesti ainutlaatuisia pintamerkkejä, ja niiden immunogeeninen profiili on alhaisempi, minkä vuoksi ne soveltuvat erityisen hyvin allogeenisiin sovelluksiin ja vähentävät immuunijärjestelmän hylkimisriskiä.

In vitro napanuoravaltimosta peräisin olevat MSC:t osoittavat vahvaa monipotenssia, ja ne pystyvät erilaistumaan adiposyyteiksi, osteoblasteiksi ja kondrosyyteiksi, kun ne altistetaan erityisille erilaistumisvälineille. Tämä monipuolisuus on verrattavissa muista kudoksista peräisin olevien MSC:iden monipuolisuuteen, mutta sen lisäetuna on niiden primitiivinen luonne, joka voi parantaa niiden terapeuttista potentiaalia. Jokaiselle näiden MSC-solujen erälle tehdään tiukka laadunvalvonta, johon sisältyy elinkelpoisuuden, puhtauden ja tehon arviointi, jolla varmistetaan, että solut täyttävät korkeat vaatimukset tutkimussovelluksia varten. Solut kryosäilytetään varhaisissa vaiheissa käyttäen erikoistunutta kryomediumia, jolloin niiden korkea elinkelpoisuus (92-95 %) säilyy sulatettaessa, mikä on ratkaisevan tärkeää niiden tehokkaan käytön kannalta jatkokäyttösovelluksissa.

Kaiken kaikkiaan napanuoran valtimosta peräisin olevat hMSC-solut tarjoavat yhdistelmän helppokäyttöisyyttä, suurta proliferatiivista kapasiteettia ja vähäistä immunogeenisuutta, mikä tekee niistä arvokkaan välineen monenlaisiin tutkimuksiin, erityisesti sellaisiin, joissa keskitytään regeneratiiviseen lääketiede- ja immuunimodulaatioon. Nämä solut, jotka on kerätty täydellä luovuttajan suostumuksella, ovat laadukas ja eettisesti kestävä vaihtoehto tutkijoille, jotka haluavat tutkia mesenkymaalisten kantasolujen koko potentiaalia in vitro.

Kudos
Napanuora - valtimo
Sovellukset
Lääketestaus, regeneratiivinen lääketiede, sairauksien tutkimus

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Määrittelemätön
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Hyvin levinnyt karanmuotoinen, fibroblastin kaltainen morfologia vähintään 5 läpiviennin ajan. Alle 2 %:lla soluista on spontaani myofibroblastin kaltainen morfologia kussakin läpiviennissä.
Solutyyppi
Kantasolu

04Tunnisteet

Lähdeviite
Ihmisen mesenkymaaliset kantasolut, napanuora - valtimo (Cytionin luettelonumero 300648)
NCBI-verotunnus
9606

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Virtaussytometria-analyysissä käytetään kattavaa merkkiainepaneelia, mukaan lukien CD73/CD90/CD105 (positiivinen) ja CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negatiivinen), viljeltyjen MSC:iden (P2-P3) tunnistamiseksi ennen kryosäilytystä. ISCT:n MSC-komitea suosittelee näitä merkkiaineita.
Virukset
Luovuttaja on negatiivinen HBV:n (PCR), Treponema pallidumin (PCR) ja HIV-1/2:n (IFA) suhteen. Solut ovat negatiivisia HBV:n, HCV:n, HSV1:n, HSV2:n, CMV:n, EBV:n, HHV6:n, Toxoplasma gondii:n, Treponema pallidumin, Chlamydia trachomatis:n, Ureaplasma urealyticum:n ja Ureaplasma parvum:n suhteen.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiili glutamiini, w/o: Ribonukleosidit, w/o: Deoksiribonukleosidit, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Lisätään väliaineeseen 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Dissosiaatioreagenssi
Trypsin-EDTA
Soluviljely
Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään sopiva määrä trypsiini/EDTA-liuosta viljelyastian koon mukaan (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa, kunnes solut irtoavat (5-10 minuuttia). Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täyttä elatusainetta trypsiinin/EDTA:n inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta aliquota uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
Ensimmäinen nesteen uusiminen 24 tunnin kuluttua, sitten 2-3 päivän välein.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme 80 % FBS + 10 % perusmediaa + 10 % DMSO:ta elinkelpoisuuden säilyttämiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka tarjoaa erinomaisen kryosuojan ja estää ei-toivotun erilaistumisen säilyttäen samalla pluripotenssin.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Kysy lisää
Etnisyys
Kaukasialainen