Gå direkte til indholdet
Human Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord - Artery
Væv
Navlestreng - arterie

Dokumenter

Human Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord - Artery

Cell line · Varenummer 300648

Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) derived from the umbilical cord artery are a distinct and promising subtype of mesenchymal stem cells, offering sever...

€690.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Humane mesenkymale stamceller (hMSC'er) fra navlestrengsarterien er en særskilt og lovende undertype af mesenkymale stamceller, der giver flere unikke fordele i forhold til andre MSC-kilder. I modsætning til MSC'er, der stammer fra knoglemarv eller fedtvæv, høstes MSC'er fra navlestrengsarterien fra en mere primitiv og mindre invasiv kilde, hvilket giver en yngre og potentielt mere potent cellepopulation. Denne oprindelse giver en højere proliferativ kapacitet og længere telomerer, hvilket kan forbedre deres selvfornyelsesevne og reducere risikoen for senescens under længerevarende dyrkning. Desuden udtrykker MSC'er fra navlestrengsarterien typisk et unikt sæt af overflademarkører og har en lavere immunogen profil, hvilket gør dem særligt velegnede til allogene anvendelser og reducerer risikoen for immunafstødning.

In vitro viser MSC'er fra navlestrengsarterien robust multipotens med evnen til at differentiere til adipocytter, osteoblaster og chondrocytter, når de udsættes for specifikke differentieringsmedier. Denne alsidighed kan sammenlignes med MSC'er, der stammer fra andre væv, men med den ekstra fordel, at de er primitive, hvilket kan forbedre deres terapeutiske potentiale. Hver batch af disse MSC'er gennemgår streng kvalitetskontrol, herunder vurderinger af levedygtighed, renhed og styrke, hvilket sikrer, at cellerne opfylder høje standarder for forskningsanvendelser. Cellerne kryopræserveres ved tidlige passager ved hjælp af et specialiseret kryomedium, der bevarer deres høje levedygtighed (92-95 %) ved optøning, hvilket er afgørende for deres effektive brug i downstream-applikationer.

Samlet set tilbyder hMSC'er fra navlestrengsarterien en kombination af let tilgængelighed, høj proliferativ kapacitet og lav immunogenicitet, hvilket gør dem til et værdifuldt værktøj til en lang række forskningsundersøgelser, især dem, der fokuserer på regenerativ medicin og immunmodulation. Disse celler, der er høstet med fuldt donorsamtykke, udgør en etisk mulighed af høj kvalitet for forskere, der ønsker at udforske det fulde potentiale af mesenkymale stamceller in vitro.

Væv
Navlestreng - arterie
Anvendelser
Test af lægemidler, regenerativ medicin, sygdomsforskning

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Veludbredt spindelformet, fibroblastlignende morfologi i mindst 5 passager. Færre end 2 % af cellerne udviser spontan myofibroblast-lignende morfologi inden for hver passage.
Celletype
Stamcelle

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Humane mesenkymale stamceller, navlestreng - arterie (Cytion katalognummer 300648)
NCBI-skattenummer
9606

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
Et omfattende panel af markører, herunder CD73/CD90/CD105 (positive) og CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negative), anvendes i flowcytometrianalyse til at identificere dyrkede MSC'er (P2-P3) før kryopræservering. Disse markører anbefales af ISCT's MSC-udvalg.
Vira
Donor er negativ for HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) og HIV-1/2 (IFA). Cellerne er negative for HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum og Ureaplasma parvum.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Alpha MEM, m: 2,0 mM stabil glutamin, uden: Ribonukleosider, w/o: Deoxyribonukleosider, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS, 2 ng/mL bFGF
Dissociationsreagens
Trypsin-EDTA
Oddyrkning
Til rutinemæssig adhærent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmedium fra de adhærente celler, og vask dem med PBS for at fjerne eventuelt resterende medium. Efter opsugning af PBS tilsættes den passende mængde Trypsin/EDTA-opløsning baseret på kulturbeholderens størrelse (f.eks. 1 ml til en T25-kolbe, 3 ml til en T75-kolbe), og der inkuberes ved stuetemperatur eller 37 °C, indtil cellerne løsner sig (5-10 minutter). Overvåg løsrivelsen under et mikroskop, og bank forsigtigt på beholderen, hvis det er nødvendigt for at frigøre cellerne. Når cellerne er løsnet, tilsættes komplet medium for at inaktivere trypsin/EDTA, cellerne resuspenderes forsigtigt, og en alikvot del af cellesuspensionen overføres til en ny kulturbeholder, der indeholder frisk medium. Anbring beholderen i en inkubator, der er indstillet til 37 °C med 5 %CO2, og skift mediet hver 2.-3. dag.
Såtæthed
1 til 3 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Første væskefornyelse efter 24 timer, derefter hver 2. til 3. dag.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi 80 % FBS + 10 % basalmedium + 10 % DMSO for at opretholde levedygtigheden eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100) for at opnå en bedre kryobeskyttelse, der forhindrer uønsket differentiering og samtidig bevarer pluripotensen.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Spørg venligst
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk