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Human Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord - Artery
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Nabelschnur - Arterie

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Human Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord - Artery

Cell line · Artikelnummer 300648

Human Mesenchymal Stem Cells (hMSCs) derived from the umbilical cord artery are a distinct and promising subtype of mesenchymal stem cells, offering sever...

€690.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Auftragsfertigung
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Humane mesenchymale Stammzellen (hMSC) aus der Nabelschnurarterie sind eine besondere und vielversprechende Unterart von mesenchymalen Stammzellen, die gegenüber anderen MSC-Quellen mehrere einzigartige Vorteile bieten. Im Gegensatz zu MSC, die aus Knochenmark oder Fettgewebe stammen, werden MSC aus der Nabelschnurarterie aus einer primitiveren und weniger invasiven Quelle gewonnen, die eine jüngere und potenziell potentere Zellpopulation liefert. Diese Herkunft verleiht ihnen eine höhere Proliferationsfähigkeit und längere Telomere, was ihre Fähigkeit zur Selbsterneuerung verbessern und das Risiko der Seneszenz bei längerer Kultur verringern könnte. Darüber hinaus exprimieren MSZ aus der Nabelschnurarterie typischerweise eine Reihe einzigartiger Oberflächenmarker und haben ein geringeres immunogenes Profil, was sie für allogene Anwendungen besonders geeignet macht und das Risiko einer Immunabstoßung verringert.

In vitro zeigen aus der Nabelschnurarterie gewonnene MSZ eine robuste Multipotenz und die Fähigkeit, sich in Adipozyten, Osteoblasten und Chondrozyten zu differenzieren, wenn sie spezifischen Differenzierungsmedien ausgesetzt werden. Diese Vielseitigkeit ist mit der von aus anderen Geweben stammenden MSZ vergleichbar, hat aber den zusätzlichen Vorteil, dass sie primitiv sind, was ihr therapeutisches Potenzial erhöhen kann. Jede Charge dieser MSZ wird einer strengen Qualitätskontrolle unterzogen, bei der unter anderem Lebensfähigkeit, Reinheit und Potenz geprüft werden, um sicherzustellen, dass die Zellen den hohen Standards für Forschungsanwendungen entsprechen. Die Zellen werden in frühen Passagen in einem speziellen Kryomedium kryokonserviert, wodurch ihre hohe Lebensfähigkeit (92 % bis 95 %) nach dem Auftauen erhalten bleibt, was für ihren effektiven Einsatz in nachgelagerten Anwendungen entscheidend ist.

Insgesamt bieten hMSCs aus der Nabelschnurarterie eine Kombination aus leichter Zugänglichkeit, hoher Proliferationskapazität und geringer Immunogenität, was sie zu einem wertvollen Instrument für eine Vielzahl von Forschungsstudien macht, insbesondere für solche, die sich auf regenerative Medizin und Immunmodulation konzentrieren. Diese mit vollem Einverständnis des Spenders gewonnenen Zellen stellen eine hochwertige und ethisch vertretbare Option für Forscher dar, die das gesamte Potenzial mesenchymaler Stammzellen in vitro erforschen wollen.

Gewebe
Nabelschnur - Arterie
Anwendungen
Arzneimitteltests, regenerative Medizin, Krankheitsforschung

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Nicht näher bezeichnet
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Gut verteilte spindelförmige, fibroblastenähnliche Morphologie für mindestens 5 Passagen. Weniger als 2 % der Zellen weisen in jeder Passage eine spontane myofibroblastenähnliche Morphologie auf.
Zelltyp
Stammzelle

04Bezeichner

Quellenangabe
Humane mesenchymale Stammzellen, Nabelschnur - Arterie (Cytion Katalognummer 300648)
NCBI-Steuer-ID
9606

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Ein umfassendes Panel von Markern, darunter CD73/CD90/CD105 (positiv) und CD14/CD34/CD45/HLA-DR (negativ), wird in der Durchflusszytometrie-Analyse verwendet, um kultivierte MSC (P2-P3) vor der Kryokonservierung zu identifizieren. Diese Marker werden vom MSC-Ausschuss der ISCT empfohlen.
Viren
Der Spender ist negativ für HBV (PCR), Treponema pallidum (PCR) und HIV-1/2 (IFA); die Zellen sind negativ für HBV, HCV, HSV1, HSV2, CMV, EBV, HHV6, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum und Ureaplasma parvum.

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, ohne: Ribonukleoside, w/o: Deoxyribonukleoside, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10 % FBS, 2 ng/ml bFGF
Dissoziationsreagenz
Trypsin-EDTA
Subkultivierung
Für die routinemäßige adhärente Zellkultur: Saugen Sie das alte Kulturmedium von den adhärenten Zellen ab und waschen Sie sie mit PBS, um das restliche Medium zu entfernen. Nach dem Absaugen des PBS die entsprechende Menge Trypsin/EDTA-Lösung je nach Größe des Kulturgefäßes zugeben (z. B. 1 ml für einen T25-Kolben, 3 ml für einen T75-Kolben) und bei Raumtemperatur oder 37 °C inkubieren, bis sich die Zellen ablösen (5-10 Minuten). Überwachen Sie die Ablösung unter dem Mikroskop und klopfen Sie bei Bedarf vorsichtig auf das Gefäß, um die Zellen freizusetzen. Sobald sich die Zellen abgelöst haben, fügen Sie vollständiges Medium hinzu, um das Trypsin/EDTA zu inaktivieren, resuspendieren Sie die Zellen vorsichtig und transferieren Sie einen aliquoten Teil der Zellsuspension in ein neues Kulturgefäß mit frischem Medium. Stellen Sie das Gefäß in einen auf 37°C und 5%CO2 eingestellten Inkubator und wechseln Sie das Medium alle 2-3 Tage.
Aussaatdichte
1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
Erste Flüssigkeitserneuerung nach 24 Stunden, dann alle 2 bis 3 Tage.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 80 % FBS + 10 % Basalmedium + 10 % DMSO, um die Lebensfähigkeit zu erhalten, oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) für einen besseren Kryoschutz, der eine unerwünschte Differenzierung verhindert und gleichzeitig die Pluripotenz bewahrt.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Bitte anfragen
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch