HK-CRISPR-NUP205-mEGFP

Linia komórkowa HK-CRISPR-NUP205-mEGFP to genetycznie zmodyfikowana ludzka linia komórkowa zaprojektowana do badania nukleoporyny 205 (NUP205) i jej roli w kompleksie porów jądrowych. Zmodyfikowana za pomocą CRISPR-Cas9 w celu znakowania NUP205 monomerycznym wzmocnionym zielonym białkiem fluorescencyjnym (mEGFP), umożliwia wizualizację i śledzenie NUP205 w żywych komórkach, wspomagając badania nad mechanizmami transportu jądrowego i dynamiką kompleksu porów jądrowych.

NUP205 jest krytycznym składnikiem kompleksu porów jądrowych, regulującym transport cząsteczek między jądrem a cytoplazmą. Znakowanie NUP205 za pomocą mEGFP pozwala naukowcom obserwować jego lokalizację i zachowanie w czasie rzeczywistym pod mikroskopem fluorescencyjnym, dzięki czemu ta linia komórkowa jest szczególnie przydatna do badania strukturalnych i funkcjonalnych aspektów kompleksów porów jądrowych oraz ich roli w ekspresji genów, przetwarzaniu RNA i cyklu komórkowym.

Linia komórkowa HK-CRISPR-NUP205-mEGFP jest potężnym narzędziem do badania mechanizmów transportu nukleocytoplazmatycznego i roli kompleksu porów jądrowych w homeostazie komórkowej. Jest również cenna do badania, w jaki sposób zakłócenia w funkcjonowaniu porów jądrowych przyczyniają się do chorób takich jak rak i zaburzenia neurodegeneracyjne, oferując solidny model do lepszego zrozumienia transportu jądrowego i jego wpływu na zdrowie ludzi.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym