Gå direkt till innehållet
HK-CRISPR-NUP205-mEGFP
Vävnad
Endocervix
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Primärtumörens lokalisation (endocervix)
Synonymer
HK-CRISPR-NUP205-mEGFP #81

HK-CRISPR-NUP205-mEGFP

Cell line · Produktnummer 301574

Cellinjen HK-CRISPR-NUP205-mEGFP är en genetiskt modifierad mänsklig cellinje som har utvecklats för att studera nukleoporin 205 (NUP205) och dess roll i kärnporerna...

€800.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

HK-CRISPR-NUP205-mEGFP-cellinjen är en genetiskt modifierad human cellinje utformad för att studera nukleoporin 205 (NUP205) och dess roll i kärnporkomplexet. Modifierad med CRISPR-Cas9 för att märka NUP205 med monomert förstärkt grönt fluorescerande protein (mEGFP), möjliggör den visualisering och spårning av NUP205 i levande celler, vilket underlättar forskning om nukleära transportmekanismer och kärnporkomplexets dynamik.

NUP205 är en kritisk komponent i kärnporkomplexet som reglerar molekyltransporten mellan kärnan och cytoplasman. Genom att märka NUP205 med mEGFP kan forskare observera dess lokalisering och beteende i realtid under ett fluorescensmikroskop, vilket gör denna cellinje särskilt användbar för att studera kärnporskomplexens strukturella och funktionella aspekter och deras roller i genuttryck, RNA-bearbetning och cellcykeln.

HK-CRISPR-NUP205-mEGFP-cellinjen är ett kraftfullt verktyg för att undersöka nukleocytoplasmatiska transportmekanismer och kärnporskomplexets roll i cellulär homeostas. Den är också värdefull för att utforska hur störningar i kärnporfunktionen bidrar till sjukdomar som cancer och neurodegenerativa sjukdomar, och erbjuder en robust modell för att öka vår förståelse av kärntransport och dess konsekvenser för människors hälsa.

Vävnad
Endocervix
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Primärtumörens lokalisation (endocervix)
Ansökningar
Biologi kring kärnporkomplexets (NPC) stödstruktur; avbildning av nukleoporinet NUP205 i stödstrukturen; visualisering av mEGFP i levande celler; superupplösningsmikroskopi; validering av CRISPR-knock-in; transport mellan kärna och cytoplasma; NPC:s strukturella organisation
Synonymer
  • HK-CRISPR-NUP205-mEGFP #81

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR-engineered mEGFP fusion at the NUP205 locus for scaffold-level nuclear pore research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande celler med mosaikstensform
Celltyp
Epiteliala celler

04Identifierare

Källa
HK-CRISPR-NUP205-mEGFP (Cytion katalognummer 301574)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_UR49
Insättare
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

05Uttryck och mottaglighet

Produkter
EGFP (förstärkt grönt fluorescerande protein)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
30 år
Etnicitet
Afroamerikan