
- Vev
- Endocervix
- Sykdom
- Adenokarsinom
- Metastaseområde
- Primær tumorlokalisering (endocervix)
- Synonymer
- HK-CRISPR-NUP205-mEGFP #81
Dokumenter
HK-CRISPR-NUP205-mEGFP
Cell line · Produktnummer 301574
HK-CRISPR-NUP205-mEGFP-cellelinjen er en genetisk modifisert menneskelig cellelinje utviklet for å studere nukleoporin 205 (NUP205) og dets rolle i kjernens po...
Tilpasning / Anbefalinger
- HK-CRISPR-NUP205-mEGFPCell line€800.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
HK-CRISPR-NUP205-mEGFP-cellelinjen er en genmodifisert human cellelinje som er utviklet for å studere nukleoporin 205 (NUP205) og dets rolle i kjerneporkomplekset. Den er modifisert med CRISPR-Cas9 for å merke NUP205 med monomert forsterket grønt fluorescerende protein (mEGFP), noe som muliggjør visualisering og sporing av NUP205 i levende celler og bidrar til forskning på nukleære transportmekanismer og dynamikken i kjerneporkomplekset.
NUP205 er en viktig komponent i kjerneporkomplekset, som regulerer molekyltransporten mellom kjernen og cytoplasmaet. Ved å merke NUP205 med mEGFP kan forskere observere lokalisering og oppførsel i sanntid under et fluorescensmikroskop, noe som gjør denne cellelinjen spesielt nyttig for å studere kjerneporkompleksenes strukturelle og funksjonelle aspekter og deres rolle i genuttrykk, RNA-prosessering og cellesyklus.
HK-CRISPR-NUP205-mEGFP-cellelinjen er et kraftig verktøy for å undersøke nukleocytoplasmatiske transportmekanismer og kjerneporekompleksets rolle i cellens homeostase. Den er også verdifull for å utforske hvordan forstyrrelser i kjerneporefunksjonen bidrar til sykdommer som kreft og nevrodegenerative lidelser, og den er en robust modell for å øke vår forståelse av kjernetransport og dens betydning for menneskers helse.
- Vev
- Endocervix
- Sykdom
- Adenokarsinom
- Metastaseområde
- Primær tumorlokalisering (endocervix)
- Søknader
- Biologi knyttet til nukleoporekomplekset (NPC); avbildning av nukleoporinet NUP205 i NPC-strukturen; visualisering av mEGFP i levende celler; superoppløsningsmikroskopi; validering av CRISPR-knock-in; transport mellom kjernen og cytoplasmaet; strukturell organisering av NPC
- Synonymer
- HK-CRISPR-NUP205-mEGFP #81
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Kvinne
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- GMO-status
- GMO-S1
- Detaljer om GMO-status
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR-engineered mEGFP fusion at the NUP205 locus for scaffold-level nuclear pore research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitel-lignende celler med mosaikksteinform
- Celletype
- Epitelceller
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- HK-CRISPR-NUP205-mEGFP (Cytion katalognummer 301574)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_UR49
- Innskjærer
- Ellenberg-laboratoriet (EMBL)
05Uttrykk og mottakelighet
- Produkter
- EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein)
06Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
08Donor
- Donorens alder
- 30 år
- Etnisitet
- Afroamerikaner
09Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtaler med tredjeparter gjelder
- Ja