HK-CRISPR-NUP205-mEGFP

A linha celular HK-CRISPR-NUP205-mEGFP é uma linha celular humana geneticamente modificada, concebida para estudar a nucleoporina 205 (NUP205) e o seu papel no complexo do poro nuclear. Modificada com CRISPR-Cas9 para marcar a NUP205 com a proteína fluorescente verde monomérica melhorada (mEGFP), permite a visualização e o rastreio da NUP205 em células vivas, ajudando na investigação dos mecanismos de transporte nuclear e da dinâmica do complexo de poros nucleares.

O NUP205 é um componente crítico do complexo do poro nuclear, regulando o transporte de moléculas entre o núcleo e o citoplasma. A marcação do NUP205 com mEGFP permite aos investigadores observar a sua localização e comportamento em tempo real num microscópio de fluorescência, tornando esta linha celular particularmente útil para estudar os aspectos estruturais e funcionais dos complexos de poros nucleares e o seu papel na expressão genética, no processamento do ARN e no ciclo celular.

A linha celular HK-CRISPR-NUP205-mEGFP é uma ferramenta poderosa para investigar os mecanismos de transporte nucleocitoplasmático e o papel do complexo de poro nuclear na homeostase celular. É também valiosa para explorar a forma como as perturbações na função do poro nuclear contribuem para doenças como o cancro e as perturbações neurodegenerativas, oferecendo um modelo robusto para fazer avançar a nossa compreensão do transporte nuclear e das suas implicações para a saúde humana.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia