Przejdź do treści
NOR-10
Chusteczka
Brzuch, mięśnie szkieletowe
Choroba
Normalny
Synonimy
NOR 10, NOR10, Nor10, Normal fibroblast-10

Dokumenty

NOR-10

Cell line · Numer produktu 305605

Linia komórkowa NOR-10 to model fibroblastów pochodzący z prawidłowej tkanki mięśnia szkieletowego myszy C57BL/10. Linia ta znajduje szerokie zastosowanie w badaniach nad...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa NOR-10 to model fibroblastów pochodzący z prawidłowej tkanki mięśnia szkieletowego myszy C57BL/10. Linia ta znajduje szerokie zastosowanie w badaniach nad miogenezą, biologią macierzy pozakomórkowej (ECM) oraz regeneracją mięśni szkieletowych. Wiadomo, że fibroblasty NOR-10 syntetyzują kluczowe składniki ECM, takie jak kolagen i laminina, które są niezbędne do utrzymania integralności strukturalnej oraz wspierania procesów komórkowych, takich jak adhezja, migracja i różnicowanie mioblastów. Komórki te odgrywają kluczową rolę w badaniach z zakresu inżynierii tkankowej, szczególnie w systemach współhodowli zaprojektowanych w celu naśladowania mikrośrodowiska mięśnia szkieletowego in vivo.

W zastosowaniach inżynierii tkankowej wykazano, że komórki NOR-10 wspomagają tworzenie włókien mięśniowych, gdy są hodowane w kulturze mieszanej z mioblastami lub stosowane w pożywkach kondycjonowanych przez fibroblasty (fCM). Efekt ten przypisuje się sygnalizacji parakrynnej, w której pośredniczą czynniki wzrostu i cytokiny wydzielane przez fibroblasty, w tym czynniki wzrostu fibroblastów (FGF) oraz insulinopodobne czynniki wzrostu (IGF), które sprzyjają ekspansji i różnicowaniu komórek satelitarnych w mioblasty. W hodowli z mioblastami fibroblasty NOR-10 przyczyniają się do odkładania składników macierzy pozakomórkowej (ECM), które kierują ukierunkowaniem i fuzją miotub, co czyni je niezbędnymi do opracowywania biomimetycznych tkanek mięśniowych.

W zaawansowanych badaniach nad biomateriałami fibroblasty NOR-10 wykorzystywano do tworzenia trójwymiarowych rusztowań hydrożelowych w celu badania interakcji komórka-macierz pozakomórkowa oraz mikrośrodowisk nowotworowych. Ich zdolność do aktywnego wydzielania cząsteczek macierzy pozakomórkowej oraz do adhezji komórkowo-macierzowej sprawia, że stanowią one potężny model do badania dynamicznych zachowań komórkowych, takich jak migracja i proliferacja, w środowiskach inżynierowanych. Cechy te podkreślają wszechstronność i znaczenie komórek NOR-10 zarówno w medycynie regeneracyjnej, jak i w biologii nowotworów.

Chusteczka
Brzuch, mięśnie szkieletowe
Choroba
Normalny
Synonimy
  • NOR 10
  • NOR10
  • Nor10
  • Normal fibroblast-10

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Nieokreślone
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Fibroblast

04Identyfikatory

Źródło
NOR-10 (numer katalogowy Cytion 305605)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3939

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
H-2b +

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 20% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki preparatem TrypLE Express, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut w celu ich odłączenia. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/10
Wiek dawcy
1 miesiąc