Pāriet uz saturu
NOR-10
Audums
Vēders, skeleta muskuļi
Slimība
Parasts
Sinonīmi
NOR 10, NOR10, Nor10, Normal fibroblast-10

Dokumenti

NOR-10

Cell line · Preces numurs 305605

Šūnu līnija NOR-10 ir fibroblastu modelis, kas iegūts no C57BL/10 pelēm raksturīgā normālā skeleta muskuļu auda. Šo šūnu līniju plaši izmanto pētījumos par m...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NOR-10 šūnu līnija ir fibroblastu modelis, kas iegūts no C57BL/10 pelēm raksturīgā normālā skeleta muskuļu auda. Šo šūnu līniju plaši izmanto miogēnēzes, ekstracelulārās matricas (ECM) bioloģijas un skeleta muskuļu reģenerācijas pētījumos. Ir zināms, ka NOR-10 fibroblasti sintēzē galvenās ECM sastāvdaļas, piemēram, kolagēnu un laminīnu, kas ir būtiski struktūras integritātes uzturēšanai un šādu šūnu procesu atbalstam kā mioblastu adhezija, migrācija un diferenciācija. Šīm šūnām ir izšķiroša loma audu inženierijas pētījumos, jo īpaši kopkultūras sistēmās, kas izstrādātas, lai imitētu skeleta muskuļu in vivo mikrovidē.

Audu inženierijas pielietojumos ir pierādīts, ka NOR-10 šūnas veicina miošķiedru veidošanos, ja tās tiek kopkultivētas ar mioblastiem vai izmantotas fibroblastu kondicionētā vidē (fCM). Šo efektu saista ar parakrīno signālu pārraidi, ko nodrošina fibroblastu izdalītie augšanas faktori un citokīni, tostarp fibroblastu augšanas faktori (FGF) un insulīnam līdzīgie augšanas faktori (IGF), kas veicina satelītšūnu vairošanos un diferenciāciju mioblastos. Kultivējot kopā ar mioblastiem, NOR-10 fibroblasti veicina ārējās šūnu matricas (ECM) komponentu nogulsnēšanos, kas virza miotubu izkārtošanos un saplūšanu, tādējādi padarot tos neaizstājamus biomimētisku muskuļu audu attīstībā.

Progresīvos biomateriālu pētījumos NOR-10 fibroblastus ir izmantojuši 3D hidrogēla skeleta veidošanā, lai pētītu šūnu un ārējās matricas mijiedarbību, kā arī audzēju mikrovidē. To spēja aktīvi izdalīt ECM molekulas un iesaistīties šūnu un matricas adhezijā padara tās par spēcīgu modeli dinamisku šūnu uzvedības, piemēram, migrācijas un proliferācijas, pētīšanai inženierijas vidē. Šīs īpašības uzsver NOR-10 šūnu daudzpusību un nozīmi gan reģeneratīvajā medicīnā, gan vēža bioloģijā.

Audums
Vēders, skeleta muskuļi
Slimība
Parasts
Sinonīmi
  • NOR 10
  • NOR10
  • Nor10
  • Normal fibroblast-10

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
NOR-10 (Cytion kataloga numurs 305605)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_3939

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
H-2b +

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 20% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar TrypLE Express, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C57BL/10
Donora vecums
1 mēnesis