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NOR-10
Tecido
Abdómen, músculo esquelético
Doença
Normal
Sinónimos
NOR 10, NOR10, Nor10, Normal fibroblast-10

Documentos

NOR-10

Cell line · Número do produto 305605

A linha celular NOR-10 é um modelo de fibroblastos derivado de tecido muscular esquelético normal de ratos C57BL/10. Esta linha celular é amplamente utilizada em estudos sobre...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular NOR-10 é um modelo de fibroblastos derivado de tecido muscular esquelético normal de ratos C57BL/10. Esta linha celular é amplamente utilizada em estudos sobre miogénese, biologia da matriz extracelular (MEC) e reparação do músculo esquelético. Sabe-se que os fibroblastos NOR-10 sintetizam componentes-chave da MEC, tais como o colagénio e a laminina, que são essenciais para manter a integridade estrutural e apoiar processos celulares como a adesão, a migração e a diferenciação dos mioblastos. Estas células desempenham um papel fundamental na investigação em engenharia de tecidos, particularmente em sistemas de cocultura concebidos para imitar o microambiente in vivo do músculo esquelético.

Em aplicações de engenharia de tecidos, demonstrou-se que as células NOR-10 potenciam a formação de fibras musculares quando cultivadas em co-cultura com mioblastos ou aplicadas em meios condicionados por fibroblastos (fCM). Este efeito é atribuído à sinalização paracrina mediada por fatores de crescimento e citocinas secretadas pelos fibroblastos, incluindo fatores de crescimento dos fibroblastos (FGFs) e fatores de crescimento semelhantes à insulina (IGFs), que promovem a expansão e a diferenciação das células satélite em mioblastos. Quando cultivados com mioblastos, os fibroblastos NOR-10 contribuem para a deposição de componentes da MEC que orientam o alinhamento e a fusão dos miotubos, tornando-os indispensáveis para o desenvolvimento de tecidos musculares biomiméticos.

Na investigação avançada em biomateriais, os fibroblastos NOR-10 têm sido utilizados na criação de arcabouços de hidrogel 3D para investigar as interações célula-MEC e os microambientes tumorais. A sua capacidade de secretar ativamente moléculas da MEC e de participar na adesão célula-matriz torna-as um modelo poderoso para o estudo de comportamentos celulares dinâmicos, tais como a migração e a proliferação, em ambientes criados artificialmente. Estas características sublinham a versatilidade e a importância das células NOR-10 tanto na medicina regenerativa como na biologia do cancro.

Tecido
Abdómen, músculo esquelético
Doença
Normal
Sinónimos
  • NOR 10
  • NOR10
  • Nor10
  • Normal fibroblast-10

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Não especificado
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Fibroblastos

04Identificadores

Referência
NOR-10 (número de catálogo da Cytion 305605)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_3939

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
H-2b +

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 20% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Para frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e, para frascos T75, utilizar 5-10 ml. De seguida, cobrir completamente as células com TrypLE Express, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C57BL/10
Idade do dador
1 mês