Mine otse sisu juurde
NOR-10
Kude
Kõht, skeletilihased
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
NOR 10, NOR10, Nor10, Normal fibroblast-10

Dokumendid

NOR-10

Cell line · Toote number 305605

NOR-10 rakuliin on fibroblastide mudel, mis on saadud C57BL/10 hiirte normaalsest skeletilihaskoest. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt uuringutes, mis käsitlevad...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NOR-10 rakuliin on fibroblastide mudel, mis on saadud C57BL/10 hiirte normaalsest skeletilihaskoest. Seda rakuliini kasutatakse laialdaselt müogeneesi, ekstratsellulaarse maatriksi (ECM) bioloogia ja skeletilihaste taastumise uuringutes. NOR-10 fibroblastid sünteesivad teadaolevalt ekstratsellulaarse maatriksi olulisi komponente, nagu kollageen ja laminiin, mis on hädavajalikud struktuurilise terviklikkuse säilitamiseks ning selliste rakuliste protsesside toetamiseks nagu müoblastide adhesiivsus, migratsioon ja diferentseerumine. Need rakud mängivad olulist rolli koetehnoloogia uuringutes, eriti ko-kultuuri süsteemides, mis on loodud skeletilihase in vivo mikrokeskkonda jäljendama.

Koeinseneria rakendustes on NOR-10 rakud näidanud, et need soodustavad lihaskiudude moodustumist, kui neid kasvatatakse koos müoblastidega või kasutatakse fibroblastide poolt konditsioneeritud kasvukeskkonnas (fCM). Seda mõju seostatakse parakriinse signaalimisega, mida vahendavad fibroblastide poolt eritatavad kasvufaktorid ja tsütokiinid, sealhulgas fibroblastide kasvufaktorid (FGF-d) ja insuliini sarnased kasvufaktorid (IGF-d), mis soodustavad satelliitrakkude paljunemist ja diferentseerumist müoblastideks. Müoblastidega koos kasvatamisel aitavad NOR-10 fibroblastid kaasa ekstratsellulaarse maatriksi (ECM) komponentide ladestumisele, mis suunavad müotubuste joondumist ja ühinemist, muutes need asendamatuks biomimeetiliste lihaskudede arendamisel.

Kõrgtehnoloogilises biomaterjalide uurimistöös on NOR-10-fibroblaste kasutatud 3D-hüdrogeelist raamistikute loomiseks, et uurida rakkude ja ekstratsellulaarse maatriksi vahelisi interaktsioone ning kasvajate mikrokeskkondi. Nende võime aktiivselt eritada ekstratsellulaarse maatriksi molekule ja osaleda rakkude ja maatriksi vahelises adhesiivis teeb neist võimsa mudeli dünaamiliste rakuliste käitumiste, nagu ränne ja proliferatsioon, uurimiseks insenerkeskkonnas. Need omadused rõhutavad NOR-10 rakkude mitmekülgsust ja tähtsust nii regeneratiivses meditsiinis kui ka vähibioloogias.

Kude
Kõht, skeletilihased
Haigus
Tavaline
Sünonüümid
  • NOR 10
  • NOR10
  • Nor10
  • Normal fibroblast-10

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Määratlemata
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide

04Tunnused

Viide
NOR-10 (Cytioni katalooginumber 305605)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_3939

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
H-2b +

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 20% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult TrypLE Expressiga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeeruda 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C57BL/10
Doonori vanus
1 kuu