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Células L-540
Tecido
Medula óssea
Doença
Linfoma de Hodgkin
Sinónimos
L 540, L540

Documentos

Células L-540

Cell line · Número do produto 300201

A L-540 é uma linha celular de linfoma de Hodgkin humano derivada de um doente com esta forma de cancro. Esta linha celular é amplamente utilizada em investigação centrada em...

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01Informações gerais

Descrição

A L-540 é uma linha celular de linfoma de Hodgkin humano derivada de um doente com esta forma de cancro. Esta linha celular é amplamente utilizada em investigação centrada nos mecanismos moleculares e celulares subjacentes ao linfoma de Hodgkin, uma doença maligna com origem nos linfócitos B. As células L-540 exibem as células Reed-Sternberg caraterísticas, que são uma marca registada do linfoma de Hodgkin e fundamentais para o diagnóstico desta doença. A presença destas células gigantes multinucleadas faz da L-540 um modelo inestimável para o estudo da fisiopatologia do linfoma de Hodgkin e para o rastreio de potenciais agentes terapêuticos dirigidos a estas células malignas.

Uma das caraterísticas notáveis da L-540 é a sua expressão de CD30, um membro da família de receptores do fator de necrose tumoral, que é frequentemente sobreexpressa nas células do linfoma de Hodgkin. Este facto faz da L-540 um excelente modelo para a investigação de terapias direcionadas para o CD30, como os conjugados anticorpo-fármaco. Além disso, as células L-540 têm sido utilizadas para estudar os efeitos de vários agentes quimioterapêuticos e para explorar os mecanismos de resistência aos medicamentos no linfoma. A capacidade da linha celular para formar tumores em ratinhos imunocomprometidos aumenta ainda mais a sua utilidade em estudos pré-clínicos destinados a avaliar a eficácia de novos tratamentos para o linfoma de Hodgkin.

Tecido
Medula óssea
Doença
Linfoma de Hodgkin
Sinónimos
  • L 540
  • L540

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células redondas

04Identificadores

Referência
L-540 (número de catálogo Cytion 300201)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1362

05Expressão e suscetibilidade

Vírus
Transformado pelo EBV

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 1 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
Renovação de fluidos
3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
20 anos
Etnia
Europeu