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Células SK-LMS-1
Tecido
Vulvar
Doença
Leiomiossarcoma
Sinónimos
SKLMS-1, SKLMS1

Documentos

Células SK-LMS-1

Cell line · Número do produto 300125

A SK-LMS-1 é uma linha celular de leiomiossarcoma humano que tem sido amplamente utilizada na investigação sobre o cancro, nomeadamente em estudos que analisam agentes terapêuticos direcionados...

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01Informações gerais

Descrição

A SK-LMS-1 é uma linha celular de leiomiossarcoma humano que tem sido amplamente utilizada na investigação do cancro, em particular em estudos que investigam agentes terapêuticos destinados a sarcomas de tecidos moles. O leiomiossarcoma é um tipo de tumor maligno que surge nos tecidos musculares lisos e a linha celular SK-LMS-1 modela eficazmente esta doença in vitro. Estas células expressam o proto-oncogene c-Met, que desempenha um papel crítico na tumorigénese, proliferação e metástases em muitos cancros, incluindo o leiomiossarcoma. A expressão aberrante do c-Met no SK-LMS-1 torna-o um modelo valioso para o estudo de terapias direcionadas para o c-Met.

Um estudo significativo envolveu a identificação de um péptido de ligação à c-Met, Met-pep1, através do rastreio de bibliotecas de phage display. Este péptido demonstrou especificidade para o recetor Met e foi capaz de competir com o fator de crescimento dos hepatócitos (HGF) na ligação ao recetor, inibindo a proliferação das células tumorais. As células SK-LMS-1 tratadas com Met-pep1 mostraram uma diminuição da proliferação, sugerindo que a ativação do c-Met com este péptido poderia ter potencial terapêutico. A internalização do peptídeo pelas células SK-LMS-1 após a ligação à c-Met apoia ainda mais o seu potencial como agente de diagnóstico ou terapêutico, particularmente em estudos de imagiologia nuclear em que a atividade associada ao tumor foi visualizada com sucesso in vivo utilizando xenoenxertos SK-LMS-1.

Além disso, as células SK-LMS-1 foram utilizadas para explorar os efeitos de compostos naturais como a Flavokawain B (FKB), uma chalcona derivada da planta kava. Verificou-se que a FKB induz a paragem do ciclo celular G2/M e uma apoptose robusta nas células SK-LMS-1, mediada pela regulação positiva de proteínas pró-apoptóticas como a DR5, a Bim e a Puma, e pela regulação negativa da proteína anti-apoptótica survivina. A combinação da FKB com agentes quimioterapêuticos como o docetaxel e a gemcitabina apresentou um efeito sinérgico, inibindo ainda mais o crescimento das células SK-LMS-1.

Tecido
Vulvar
Doença
Leiomiossarcoma
Sinónimos
  • SKLMS-1
  • SKLMS1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tumorigénico
Sim, em ratinhos nus. Forma leiomiossarcoma
Cariótipo
(P12) hipotriplóide a hipertriplóide (+A2, +A3, +C, +D, +E, +F, +G, -A) com anomalias incluindo dicêntricos, fragmentos acrocêntricos, quebras, constrições secundárias, minutos e grandes marcadores submetacêntricos

04Identificadores

Referência
SK-LMS-1 (número de catálogo Cytion 300125)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0628

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Tipo de sangue O, Rh+
Isoenzimas
Me-2, 2, PGM3, 1-2, PGM1, 1-2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B, Produto de frequência fenotípica: 0.0027

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
43 anos
Etnia
Caucasiano