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MM.1R
Tecido
Sangue periférico
Doença
Mieloma múltiplo
Sinónimos
MM1.r, MM.1R, MM1-R, MM-1R, MM1R, MM1.R(L), MM1.RL

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MM.1R

Cell line · Número do produto 305435

The MM1.R cell line is a derivative of the MM1 cell line, originally established from a patient with multiple myeloma (MM). MM1.R was specifically develop...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular MM1.R é um derivado da linha celular MM1, originalmente estabelecida a partir de um doente com mieloma múltiplo (MM). A MM1.R foi desenvolvida especificamente para estudar a resistência à dexametasona, um corticosteroide utilizado no tratamento do MM. A linha celular constitui um modelo robusto para explorar os mecanismos de resistência aos glicocorticóides e testar potenciais estratégias terapêuticas para superar este desafio no tratamento do MM. Tal como a MM1.S, as células MM1.R caracterizam-se por uma elevada expressão de vias de sinalização dependentes da interleucina-6 (IL-6), que são fundamentais na biologia do MM. No entanto, a MM1.R difere significativamente no seu perfil de resistência, tornando-a uma ferramenta essencial para o estudo da progressão da doença e dos mecanismos de resistência aos fármacos.

As células MM1.R apresentam alterações transcricionais e de sinalização em comparação com as MM1.S, incluindo diferenças na atividade do recetor de glicocorticóides e na modulação da via NF-kB. O fenótipo de resistência tem sido associado a aberrações nas vias apoptóticas, com uma diminuição notável na sinalização pró-apoptótica após o tratamento com dexametasona. É importante referir que estudos sobre a MM1.R destacaram o papel destas vias na resistência terapêutica, abrindo caminho para novas abordagens que visam o microambiente e as dependências de sinalização celular no MM.

A utilidade do MM1.R vai além do estudo da resistência à dexametasona. Trata-se de um modelo valioso para a avaliação de terapias combinadas, incluindo inibidores do proteassoma e fármacos imunomoduladores. O panorama genético e molecular bem documentado desta linha celular, incluindo a sua resposta a vários agentes farmacológicos, torna-a uma ferramenta indispensável para a investigação pré-clínica da MM. Estudos transcriptómicos adicionais sobre a MM1.R revelaram que, embora mantenha alguma semelhança com os perfis tumorais derivados de doentes, os seus mecanismos de resistência destacam desvios críticos em relação aos modelos de MM não resistentes, sublinhando a sua relevância no desenvolvimento terapêutico.

Tecido
Sangue periférico
Doença
Mieloma múltiplo
Sinónimos
  • MM1.r
  • MM.1R
  • MM1-R
  • MM-1R
  • MM1R
  • MM1.R(L)
  • MM1.RL

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Adesão e suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo linfoblasto
Tipo de célula
Célula B

04Identificadores

Referência
MM.1R (número de catálogo da Cytion 305435)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_8794

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Receptor de glucocorticóides, não expresso
Expressão proteica
IgA lambda
Expressão do antígeno
CD25-, CD38+, CD52+, CD59+
Perfil mutacional
Mutação: TRAF3, p.Val536_Asn545delValPheValAlaGlnThrValLeuGluAsninsAsp (c.1604-1630delTCTTTGTGGCCCAAACTGTTCTAGAAA), homozigótica

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Densidade de sementeira
4-5*10^5/ml
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
45 anos
Etnia
Afro-americano