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RenCa
Tecido
Rim
Doença
Carcinoma
Sinónimos
Renca, RENCA, Renal Carcinoma

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RenCa

Cell line · Número do produto 400321

RenCa (Renal Carcinoma) cells are a murine renal adenocarcinoma cell line. They are derived from a tumor spontaneously developed in the kidney of a BALB/c...

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01Informações gerais

Descrição

As células RenCa (Renal Carcinoma) são uma linha celular de adenocarcinoma renal murino. São derivadas de um tumor desenvolvido espontaneamente no rim de um rato BALB/c, uma estirpe consanguínea comum utilizada na investigação. As células RenCa são utilizadas extensivamente para estudar a biologia do cancro renal, a imunologia do tumor e a terapia do cancro, incluindo a eficácia dos agentes imunoterapêuticos. As células são conhecidas pela sua formação agressiva de tumores quando implantadas em ratinhos singénicos, o que as torna um modelo valioso para experiências in vivo que visam imitar a progressão do cancro e as metástases num ambiente laboratorial controlado.

As células RenCa caracterizam-se por um elevado índice mitótico e são capazes de crescer de forma independente da ancoragem, formando colónias em ágar macio, o que é uma caraterística da transformação oncogénica. Apresentam uma morfologia semelhante à dos fibroblastos e, devido à sua origem num ratinho BALB/c, as células RenCa são particularmente úteis para a investigação que utiliza ratinhos imunocompetentes, facilitando os estudos sobre a interação entre as células cancerosas e o sistema imunitário. Esta linha celular tem sido utilizada em numerosos estudos que investigam o papel de células e moléculas imunitárias específicas na supressão do crescimento tumoral e o potencial de intervenção terapêutica.

Para além da sua utilização na investigação em imunoterapia, as células RenCa têm também servido como ferramenta no estudo dos mecanismos de metástase do cancro, particularmente no contexto do sistema renal. Têm sido utilizadas para avaliar o impacto de vários genes e proteínas na invasividade tumoral e no potencial metastático, oferecendo uma perspetiva sobre as vias que podem ser utilizadas para inibir a disseminação do cancro no carcinoma renal. Estas caraterísticas fazem do RenCa um modelo crucial para a investigação fundamental e translacional do cancro.

Tecido
Rim
Doença
Carcinoma
Sinónimos
  • Renca
  • RENCA
  • Renal Carcinoma

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This murine renal carcinoma cell line (RenCa) contains stable, undefined genetic alterations associated with spontaneous tumorigenesis. The modification renders the line GMO-classified under German rules. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos singénicos
Tempo de duplicação
47 horas

04Identificadores

Referência
RenCa (número de catálogo Cytion 400321)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_2174

05Expressão e suscetibilidade

Susceptibilidade ao vírus
Testes MAP negativos (Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler`s GD VII, toolan`s H-1, MHV, RCV/SDA, M-Adenovirus)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Rápido. Viabilidade 93%. Permitir que as células recuperem do processo de congelação durante 24 a 48 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
BALB/c
Idade do dador
6 semanas