CHO-PD-L1

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Las células CHO-PD-L1 son células recombinantes de ovario de hámster chino (CHO) modificadas genéticamente para expresar de manera estable el ligando 1 de muerte programada humano (PD-L1; CD274/B7-H1), un ligando de punto de control inmunológico que desempeña un papel central en la supresión de las respuestas inmunitarias mediadas por las células T. El PD-L1 es una proteína transmembrana de tipo I que interactúa principalmente con la proteína 1 de muerte celular programada (PD-1/CD279) en las células inmunitarias activadas, lo que conduce a la inhibición de la proliferación de las células T, la producción de citocinas y la actividad citotóxica. La expresión anómala de PD-L1 es un mecanismo común de evasión inmunológica en múltiples tumores sólidos y neoplasias hematológicas, lo que hace que los modelos celulares recombinantes que expresan PD-L1 sean altamente relevantes para la investigación en inmuno-oncología y el desarrollo terapéutico.

Las células CHO-PD-L1 se utilizan ampliamente para el desarrollo y la caracterización de inhibidores de puntos de control inmunológicos, incluidos anticuerpos monoclonales, anticuerpos biespecíficos, proteínas de fusión y terapias celulares modificadas que se dirigen al eje de señalización PD-1/PD-L1. La expresión estable y controlada de PD-L1 permite la evaluación cuantitativa de la afinidad de unión de los anticuerpos, la ocupación del receptor, la actividad bloqueante, la internalización y la cinética de la interacción ligando-receptor. Estas células también son adecuadas para el desarrollo de ensayos de citometría de flujo, bioensayos con marcadores, estudios de activación de células T y plataformas de cribado de alto rendimiento diseñadas para evaluar la eficacia del bloqueo de puntos de control o la formación de sinapsis inmunes. Dado que las células CHO proporcionan un sistema de expresión robusto y con un fondo relativamente bajo, se seleccionan con frecuencia para la generación de ensayos estandarizados y aplicaciones de control de calidad biológico.

Para cultivos adherentes: DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)

Para cultivos en suspensión: Medio de crecimiento CHO A (de InSCREENeX; número de catálogo de InSCREENeX INS-ME-1039)

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Después de descongelar, divida las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en frascos T25 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (en el caso de cultivos adherentes) durante al menos 24 horas.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.