Gå til innholdet
CHO-PD-L1
Vev
Eggstokk
Sykdom
Eggstokkceller fra kinesisk hamster, ikke-neoplastiske; genetisk modifisert for PD-L1 (CD274/B7-H1)-overflateekspresjon

Dokumenter

CHO-PD-L1

Cell line · Produktnummer 305975

Ansvarsfraskrivelse: Prisene som vises for cellelinjer gjelder utelukkende for akademiske kunder og kunder i ideelle organisasjoner. For kommersielle aktører gjelder prisene...

€1,900.00ekskl. mva. og frakt
Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: Prisene som vises for cellelinjer gjelder utelukkende for akademiske kunder og kunder i ideelle organisasjoner. For kommersielle aktører er prisen ca. 6 250 euro.
Hvis du representerer en kommersiell aktør eller er usikker på hvilken kategori som gjelder, vennligst kontakt oss.


CHO-PD-L1-celler er rekombinante kinesiske hamster-eggstokkceller (CHO) som er konstruert for å uttrykke humant programmed death-ligand 1 (PD-L1; CD274/B7-H1) på en stabil måte, et immun-kontrollpunktligand som spiller en sentral rolle i undertrykkelsen av T-celle-medierte immunresponser. PD-L1 er et type I-transmembranprotein som primært interagerer med programmert celledødsprotein 1 (PD-1/CD279) på aktiverte immunceller, noe som fører til hemming av T-celleproliferasjon, cytokinproduksjon og cytotoksisk aktivitet. Unormal PD-L1-ekspresjon er en vanlig mekanisme for immununnvikelse i flere solide svulster og hematologiske maligniteter, noe som gjør PD-L1-uttrykkende rekombinante cellemodeller svært relevante for immuno-onkologisk forskning og terapeutisk utvikling.

CHO-PD-L1-celler brukes mye til utvikling og karakterisering av immuncheckpoint-hemmere, inkludert monoklonale antistoffer, bispesifikke antistoffer, fusjonsproteiner og konstruerte celleterapier rettet mot PD-1/PD-L1-signalaksen. Den stabile og kontrollerte ekspresjonen av PD-L1 muliggjør kvantitativ evaluering av antistoffbindingsaffinitet, reseptorbelegg, blokkeringsaktivitet, internalisering og kinetikk for ligand-reseptor-interaksjon. Disse cellene er også egnet for utvikling av flowcytometri-assayer, reporter-bioassayer, T-celleaktiveringsstudier og høykapasitets-screeningplattformer designet for å vurdere effektiviteten av kontrollpunktblokkering eller dannelse av immunsynapser. Fordi CHO-celler gir et robust uttrykkssystem med relativt lav bakgrunnsstøy, velges de ofte for standardisert assaygenerering og biologiske kvalitetskontrollapplikasjoner.

Vev
Eggstokk
Sykdom
Eggstokkceller fra kinesisk hamster, ikke-neoplastiske; genetisk modifisert for PD-L1 (CD274/B7-H1)-overflateekspresjon
Søknader
Antistoffscreening; utvikling av PD-L1-rettet immunterapi; forskning på kontrollpunktinhibitorer; studier av svulsters immununnvikelse; strømningscytometri

02Klassifisering

Organisme
Kinesisk hamster
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Adhesjon og suspensjon
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This CHO cell line contains a CD274 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelceller
Fordoblingstid
ca. 14–16 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CHO-PD-L1 (Cytion-katalognummer 305975)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_A8X1

05Uttrykk og mottakelighet

Overflateantigener
PD-L1 (CD274/B7-H1)
Reseptorer som uttrykkes
PD-1/CD279

06Håndtering og kultur

Næringsmedium

For adherente kulturer: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)

For suspensjonskulturer: CHO Growth Medium A (fra InSCREENeX; InSCREENeX katalognummer INS-ME-1039)

Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
For adherente kulturer: Suppler mediet med 5 % FBS. Tilsett Geneticin (G418-Sulfat) for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 0,5 mg/ml.
Dissosiasjonsmiddel
For adherente kulturer: Trypsin-EDTA
Subkultivering
For rutinemessig adherent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS for å fjerne eventuelt gjenværende medium. Etter at PBS er aspirert, tilsett et passende volum Trypsin/EDTA-løsning basert på størrelsen på dyrkingskaret (f.eks. 1 ml for en T25-kolbe, 3 ml for en T75-kolbe), og inkuber ved romtemperatur eller 37 °C i 5-10 minutter, eller til cellene løsner. Overvåk løsrivelsen under mikroskop, og bank forsiktig på beholderen om nødvendig for å frigjøre cellene. Når cellene har løsnet, tilsetter du komplett medium for å inaktivere trypsin/EDTA, resuspenderer cellene forsiktig og overfører en alikvot av cellesuspensjonen til et nytt dyrkingskar som inneholder nytt medium. Plasser karet i en inkubator innstilt på 37 °C med 5 %CO2, og bytt medium hver 2.-3. dag.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
2 til 5 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining

Etter tining deles cellene i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellene får komme seg etter fryseprosessen og feste seg (for adherente kulturer) i minst 24 timer.

Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Voksen