Siirry sisältöön
CHO-PD-L1
Kudos
Munasarja
Sairaus
Kiinalaisen hamsterin munasarjasolut, ei-neoplastiset; geneettisesti muunnettu PD-L1:n (CD274/B7-H1) pinta-ilmentymän aikaansaamiseksi

Asiakirjat

CHO-PD-L1

Cell line · Tuotenumero 305975

Vastuuvapauslauseke: Solulinjojen kohdalla ilmoitetut hinnat koskevat yksinomaan akateemisia ja voittoa tavoittelemattomia asiakkaita. Kaupallisten toimijoiden osalta hinnat...

€1,900.00ilman veroja ja toimituskuluja
Valmistetaan tilauksesta
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Vastuuvapauslauseke: Solulinjojen hinnat koskevat yksinomaan akateemisia ja voittoa tavoittelemattomia asiakkaita. Kaupallisille toimijoille hinta on noin 6 250 euroa.
Jos edustat kaupallista toimijaa tai et ole varma, kumpaanko ryhmään kuulut, ota yhteyttä meihin.


CHO-PD-L1-solut ovat rekombinantteja kiinalaisen hamsterin munasarjasoluja (CHO), jotka on muokattu ilmentämään stabiilisti ihmisen ohjelmoitua kuolemanligandia 1 (PD-L1; CD274/B7-H1), immuunivalvontapisteen ligandia, jolla on keskeinen rooli T-soluvälitteisten immuunivasteiden tukahduttamisessa. PD-L1 on tyypin I transmembraaniproteiini, joka vuorovaikuttaa pääasiassa aktivoituneiden immuunisolujen ohjelmoidun solukuoleman proteiinin 1 (PD-1/CD279) kanssa, mikä johtaa T-solujen proliferaation, sytokiinituotannon ja sytotoksisen aktiivisuuden estymiseen. PD-L1:n poikkeava ilmentyminen on yleinen mekanismi immuunivasteen kiertämisessä useissa kiinteissä kasvaimissa ja hematologisissa pahanlaatuisissa sairauksissa, mikä tekee PD-L1:tä ilmentävistä rekombinanttisista solumalleista erittäin merkityksellisiä immuno-onkologian tutkimuksessa ja hoitokeinojen kehittämisessä.

CHO-PD-L1-soluja käytetään laajalti immuunivalvontapisteiden estäjien, kuten monoklonaalisten vasta-aineiden, bispesifisten vasta-aineiden, fuusioproteiinien ja PD-1/PD-L1-signaalinakseliin kohdistuvien muunneltujen soluhoitojen, kehittämisessä ja karakterisoinnissa. PD-L1:n vakaa ja hallittu ilmentyminen mahdollistaa vasta-aineen sitoutumisaffiniteetin, reseptorin sitoutumisen, estotoiminnan, internalisoitumisen ja ligandi-reseptori-vuorovaikutuksen kinetiikan kvantitatiivisen arvioinnin. Nämä solut soveltuvat myös virtaussytometria-määritysten kehittämiseen, raportointibiotesteihin, T-solujen aktivaatiotutkimuksiin sekä suurikapasiteettisiin seulonta-alustoihin, jotka on suunniteltu arvioimaan tarkistuspisteiden eston tehokkuutta tai immuunisynapsien muodostumista. Koska CHO-solut tarjoavat vankan ja suhteellisen vähäisen taustan ilmentymisjärjestelmän, niitä valitaan usein standardoitujen määritysten luomiseen ja biologisen laadunvalvonnan sovelluksiin.

Kudos
Munasarja
Sairaus
Kiinalaisen hamsterin munasarjasolut, ei-neoplastiset; geneettisesti muunnettu PD-L1:n (CD274/B7-H1) pinta-ilmentymän aikaansaamiseksi
Sovellukset
Vasta-aineiden seulonta; PD-L1:tä kohdentavan immunoterapian kehittäminen; tarkistuspisteen estäjien tutkimus; tutkimukset kasvaimen immuunijärjestelmän kiertämisestä; virtaussytometria

02Luokittelu

Organismi
kiinalainen hamsteri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This CHO cell line contains a CD274 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Kaksinkertaistumisaika
noin 14–16 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
CHO-PD-L1 (Cytion-tuotenumero 305975)
NCBI-verotunnus
10029
Cellosaurus
CVCL_A8X1

05Ilmentyminen ja alttius

Pinta-antigeenit
PD-L1 (CD274/B7-H1)
Ilmentyvät reseptorit
PD-1/CD279

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta

Tarttuvia viljelmiä varten: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)

Suspensioviljelmiä varten: CHO Growth Medium A (InSCREENeXiltä; InSCREENeXin luettelonumero INS-ME-1039)

Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Tarttuvia viljelmiä varten: Täydennä väliaineeseen 5 % FBS:ää. Lisää genetisiiniä (G418-Sulfat), jotta lopullinen pitoisuus on 0,5 mg/ml.
Dissosiaatioreagenssi
Tarttuvia viljelmiä varten: Trypsin-EDTA
Soluviljely
Rutiininomaiseen adherenttiseen soluviljelyyn: Imeytä vanha elatusaine adheesiosoluista ja pese ne PBS:llä jäljellä olevan elatusaineen poistamiseksi. Kun PBS on imetty, lisätään sopiva määrä trypsiini/EDTA-liuosta viljelyastian koon mukaan (esim. 1 ml T25-pulloon, 3 ml T75-pulloon) ja inkuboidaan huoneenlämmössä tai 37 °C:ssa 5-10 minuuttia tai kunnes solut irtoavat. Seuraa irtoamista mikroskoopilla ja napauta astiaa tarvittaessa varovasti solujen irrottamiseksi. Kun solut ovat irronneet, lisätään täyttä elatusainetta trypsiinin/EDTA:n inaktivoimiseksi, solut suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensiosta osa uuteen kasvatusastiaan, joka sisältää tuoretta elatusainetta. Aseta astia inkubaattoriin, jonka lämpötila on 37 °C jahiilidioksidipitoisuus 5 %, ja vaihda väliaine 2-3 päivän välein.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
2–5 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen

Sulattamisen jälkeen solut jaetaan T25-pulloihin suhteessa 1:2 tai 1:3 ja annetaan solujen toipua pakastuksesta ja adheesiota (adheesioviljelmien osalta) vähintään 24 tuntia.

Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Aikuiset