Skip to content
CHO-PD-L1
Tissue
שחלה
Disease
שחלה של אוגר סיני, שאינה ממאירה; מהונדסת גנטית לביטוי שטח של PD-L1 (CD274/B7-H1)

Documents

CHO-PD-L1

Cell line · Product number 305975

Disclaimer: The prices displayed for cell lines are exclusively for academic/not-for-profit customers. For commercial entitites the pr...

US$1,900.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

הצהרת הבהרה: המחירים המוצגים עבור קווי התאים מיועדים אך ורק ללקוחות אקדמיים או ללא כוונת רווח. עבור גופים מסחריים, המחיר הוא כ-6,250 אירו.
אם אתה מייצג גוף מסחרי או שאינך בטוח לאיזו קטגוריה אתה משתייך, אנא פנה אלינו.


תאי CHO-PD-L1 הם תאי שחלה של אוגר סיני (CHO) מהונדסים, שנועדו לבטא באופן יציב את הליגנד 1 של מוות מתוכנן אנושי (PD-L1; CD274/B7-H1), ליגנד של נקודת בקרה חיסונית הממלא תפקיד מרכזי בדיכוי תגובות חיסוניות המתווכות על ידי תאי T. PD-L1 הוא חלבון טרנסממברני מסוג I המקיים אינטראקציה בעיקר עם חלבון המוות התאי המתוכנן 1 (PD-1/CD279) על תאי חיסון מופעלים, מה שמוביל לעיכוב של התרבות תאי T, ייצור ציטוקינים ופעילות ציטוטוקסית. ביטוי חריג של PD-L1 הוא מנגנון נפוץ של התחמקות חיסונית בגידולים מוצקים רבים ובמחלות ממאירות המטולוגיות, מה שהופך מודלים של תאים רקומביננטיים המבטאים PD-L1 לרלוונטיים ביותר למחקר אימונו-אונקולוגי ולפיתוח טיפולי.

תאי CHO-PD-L1 נמצאים בשימוש נרחב לפיתוח ואפיון של מעכבי נקודות בקרה חיסוניות, כולל נוגדנים מונוקלונליים, נוגדנים דו-ספציפיים, חלבוני פיוז'ן וטיפולים בתאים מהונדסים המכוונים לציר האיתות PD-1/PD-L1. הביטוי היציב והמבוקר של PD-L1 מאפשר הערכה כמותית של זיקה לקשירת נוגדנים, תפוסת קולטנים, פעילות חסימה, פנימיזציה וקינטיקה של אינטראקציה בין ליגנד לקולטן. תאים אלה מתאימים גם לפיתוח בדיקות ציטומטריה זרימתית, בדיקות ביולוגיות מדווחות, מחקרים על הפעלת תאי T ופלטפורמות סינון בתפוקה גבוהה שנועדו להעריך את יעילות חסימת נקודות הבקרה או את היווצרות הסינפסה החיסונית. מכיוון שתאי CHO מספקים מערכת ביטוי חזקה ובעלת רקע נמוך יחסית, הם נבחרים לעתים קרובות ליצירת בדיקות סטנדרטיות וליישומים של בקרת איכות ביולוגית.

Tissue
שחלה
Disease
שחלה של אוגר סיני, שאינה ממאירה; מהונדסת גנטית לביטוי שטח של PD-L1 (CD274/B7-H1)
Applications
בדיקת נוגדנים; פיתוח אימונותרפיה המכוונת ל-PD-L1; מחקר בנושא מעכבי נקודות בקרה; מחקרים בנושא התחמקות הגידול ממערכת החיסון; ציטומטריית זרימה

02Classification

Organism
Chinese hamster
Sex
Female
Growth properties
Adherent and suspension
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This CHO cell line contains a CD274 expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Cell type
תאי אפיתל
Doubling time
כ-14–16 שעות

04Identifiers

Citation
CHO-PD-L1 (מספר קטלוגי של Cytion: 305975)
NCBI TaxID
10029
Cellosaurus
CVCL_A8X1

05Expression and susceptibility

Surface antigens
PD-L1 (CD274/B7-H1)
Receptors expressed
PD-1/CD279

06Handling and culture

Culture medium

לתרבויות דבקות: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)

לתרבויות בתמיסה: CHO Growth Medium A (מ-InSCREENeX; מספר קטלוגי InSCREENeX INS-ME-1039)

Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
לתרבויות דבקות: הוסף לתמיסה 5% FBS. הוסף Geneticin (G418-Sulfat) כדי להגיע לריכוז סופי של 0.5 מ"ג/מ"ל.
Dissociation reagent
לתרבויות דבקות: טריפסין-EDTA
Subculturing
לגידול תאים נצמדים שגרתי: שאבו את המדיום הישן מהתאים הנצמדים ושטפו אותם ב-PBS כדי להסיר את כל שאריות המדיום. לאחר שאיבת ה-PBS, הוסף את הנפח המתאים של תמיסת טריפסין/EDTA בהתאם לגודל כלי התרבית (לדוגמה, 1 מ"ל עבור בקבוק T25, 3 מ"ל עבור בקבוק T75) והדגיר בטמפרטורת החדר או ב-37°C למשך 5-10 דקות, או עד שהתאים יתנתקו. עקבו אחר ההתנתקות תחת מיקרוסקופ, ובמידת הצורך טפחו קלות על הכלי כדי לשחרר את התאים. לאחר ההתנתקות, הוסיפו מצע מלא כדי להשבית את הטריפסין/EDTA, ערבבו קלות את התאים והעבירו חלק מהתאים המושהים לכלי תרבית חדש המכיל מצע טרי. הכניסו את הכלי לאינקובטור המכוון ל-37°C עם 5%CO2, והחליפו את המצע כל 2-3 ימים.
Split ratio
1 עד 5
Seeding density
2 עד 5 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery

לאחר ההפשרה, חלק את התאים ביחס של 1:2 עד 1:3 בצלוחיות T25 והמתן לפחות 24 שעות עד שהתאים יתאוששו מתהליך ההקפאה וידבקו (בתרבויות דבקות).

Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
מבוגר