GT1-7

GT1-7 הוא תת-קו של תאי עצב היפותלמיים של עכברים שהפכו לבלתי מתים, המייצרים ומפרישים הורמון משחרר גונדוטרופין (GnRH), הידוע גם כהורמון משחרר לוטניזציה (LHRH). תאים אלה פותחו באמצעות גידולים ממוקדים גנטית באמצעות מודל עכברים טרנסגניים, שבו האנטיגן T הגדול SV40 בא לידי ביטוי תחת בקרת מקדם הגן GnRH. אסטרטגיה זו הובילה לגידולים בהיפותלמוס, מהם נגזרו מספר קווי תאים מפרישי GnRH, כולל GT1-1, GT1-3 ו-GT1-7. תאי GT1-7 מציגים פנוטיפ עצבי מובחן, כולל ביטוי של סמנים ספציפיים לעצבים כגון חלבוני נוירופילמנט, אנולאז ספציפי לעצבים, חלבונים הקשורים לווסקולות סינפטיות (VAMP-2, SNAP-25) וכרומוגרנין B. הם אינם מבטאים סמנים גליאליים כגון GFAP או חלבוני מיאלין, מה שמאשר את זהותם העצבית.

מבחינה תפקודית, תאי GT1-7 מבטאים mRNA אנדוגני של GnRH ומפרישים GnRH בדפוס אפיזודי. הם בעלי מנגנון עיבוד מלא להמרת pro-GnRH ל-GnRH בוגר וביו-אקטיבי, כולל האנדו-פפטידאזות, הקרבוקסי-פפטידאזות והאנזימים האמידטיים הנדרשים. תאים אלה מפרישים גם פפטיד הקשור ל-GnRH (GAP), תוצר לוואי של עיבוד pro-GnRH. אפיון ביוכימי חשף צורות מולקולריות מרובות של pro-GnRH ו-GnRH בוגר בתוך תאי GT1-7 ובתוך מצע התרבית, מה שמעיד על עיבוד פוסט-תרגומי פעיל. ה-GnRH המופרש על ידי GT1-7 הוא פעיל ביולוגית, ומסוגל לעורר שחרור LH מתאי יותרת המוח הקדמית במבחנה.

תאי GT1-7 מפגינים פעילות נדידה נמוכה במבחנה, בניגוד לקווי תאים GnRH אחרים כגון GN11, שמקורם בנוירונים GnRH נדידים, פחות בוגרים מבחינה התפתחותית. תאי GT1-7 נחשבים לייצוגיים של נוירונים GnRH היפותלמיים לאחר נדידה, ויוצרים בתרבית מושבות מחוברות היטב, הקשורות לנוירונים. חוסר התנועתיות שלהם, יחד עם תכונות נוירוניות בוגרות ותגובתיות לגורמים רגולטוריים, הופכים אותם למודל רב עוצמה לחקר ויסות גנים, בקרת התפתחות ופיזיולוגיה הפרשתית של נוירונים GnRH היפותלמיים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו