OLN-93

OLN-93 הוא קו תאים אוליגודנדרוגליאלי קבוע, שמקורו בתרבויות גליה ראשוניות של מוח עכברים יילודים. קו התאים מקורו בתאים שעברו שינוי ספונטני בתרבויות גליה מעורבות, והוא מאופיין בשמירה על תכונות אוליגודנדרוגליאליות יציבות לאורך תקופות גידול ממושכות. תאי OLN-93 מתרבים ברציפות בנוכחות סרום, עם זמן הכפלה של כ-16-18 שעות, ושומרים על מאפיינים מרכזיים של אוליגודנדרוציטים מובחנים. ניתוחים אימונוציטוכימיים וביוכימיים מראים שתאים אלה מבטאים סמנים עיקריים ספציפיים למיאלין, כולל גלקטוצרברוזיד (GC), חלבון בסיסי של מיאלין (MBP), גליקופרוטאין הקשור למיאלין (MAG), חלבון פרוטאוליפיד (PLP) וחלבון וולפגרם (WP). הביטוי של PLP והאיזופורם שלו, DM20, אשר עבר ספלייסינג חלופי, אושר ברמת ה-mRNA באמצעות RT-PCR.

חשוב לציין שתאי OLN-93 אינם מבטאים את סמני האסטרוציטים וימנטין וחלבון פיברילרי חומצי גליאלי (GFAP), ואף לא את סמן קודמי האוליגודנדרוציטים A2B5, מה שמעיד על פנוטיפ מובחן שאינו קודמי. מבחינה מורפולוגית, התאים מציגים מראה דו-קוטבי בתנאי תרבית סטנדרטיים ומפתחים שלוחות ענפיות כאשר הם גדלים בצפיפות נמוכה או בסביבות עם רמת סרום נמוכה, בדומה לאוליגודנדרוציטים לא בשלים או בשלב מוקדם לאחר הלידה. מאפיינים אלה הופכים את OLN-93 למודל בעל ערך לחקר התמיינות האוליגודנדרוציטים, ביטוי חלבוני המיאלין, והאינטראקציות עם נוירונים או סוגי תאי גליה אחרים במבחנה.

תאי OLN-93 עברו גם הנדסה גנטית לצורך חקר תהליכים של מחלות ניווניות. לדוגמה, כאשר הם עוברים טרנספקציה לביטוי של α-סינוקלאין אנושי (כולל המוטציה A53T) וחלבון טאו, הם משמשים כמודל לחקירת מנגנונים של צבירת חלבונים בתנאי לחץ. בעת חשיפה למתח חמצוני ופרוטאזומלי, תאי OLN-93 יוצרים אגרגטים חיוביים לתיופלבין S, הממוקמים יחד עם α-סינוקלאין, טאו ו-αB-קריסטלין, בדומה לתכלילים ציטופלזמטיים גליהיים הנצפים בסינוקלינופתיות כגון אטרופיה רב-מערכתית. שינויים אלה, הנגרמים על ידי לחץ, במסיסות החלבון ובהרכב הצברים מדגישים את התועלת של OLN-93 כמערכת מודל לחקר הפרוטאוסטזיס, ביולוגיית החפרונים והתגובות התאיות של האוליגודנדרוציטים לאגרגציה פתולוגית של חלבונים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו