OLN-93

OLN-93 je trajna linija oligodendroglialnih celic, pridobljena iz primarnih glialnih kultur možganov novorojenih podgan. Linija izhaja iz spontano transformiranih celic v mešanih glialnih kulturah in je bila opredeljena kot linija, ki ohranja stabilne oligodendroglialne lastnosti tudi v daljšem kultiviranju. Celice OLN-93 se v prisotnosti seruma neprekinjeno razmnožujejo, s časom podvojitve približno 16–18 ur, in ohranjajo ključne značilnosti diferenciranih oligodendrocitov. Imunocitokemične in biokemične analize kažejo, da te celice izražajo glavne markerje, specifične za mielin, vključno z galaktocerebrozidom (GC), osnovnim mielinskim proteinom (MBP), mielinskim glikoproteinom (MAG), proteolipidnim proteinom (PLP) in Wolfgramovim proteinom (WP). Ekspresija PLP in njegove alternativno spletene izoforme DM20 je bila potrjena na ravni mRNA z uporabo RT-PCR.

Pomembno je, da celice OLN-93 ne izražajo astrocitnih markerjev vimentina in glialnega fibrilarnega kislega proteina (GFAP) niti markerja predhodnika oligodendrocitov A2B5, kar kaže na diferenciran, ne-predhodniški fenotip. Morfološko imajo celice v standardnih kultivnih pogojih bipolaren videz in razvijejo drevesaste izrastke, ko rastejo v nizki gostoti ali v okoljih z nizko vsebnostjo seruma, kar spominja na nezrele ali zgodnje postnatalne oligodendrocite. Te značilnosti naredijo OLN-93 dragocen model za študij diferenciacije oligodendrocitov, ekspresije mielinskih proteinov in interakcij z nevroni ali drugimi tipi glialnih celic in vitro.

Celice OLN-93 so bile genetsko spremenjene tudi za preučevanje procesov nevrodegenerativnih bolezni. Na primer, ko so transfektirane za izražanje človeškega α-sinukleina (vključno z mutacijo A53T) in tau proteina, služijo kot model za preučevanje mehanizmov agregacije proteinov pod stresom. Ob izpostavljenosti oksidativnemu in proteasomskemu stresu celice OLN-93 tvorijo agregate, pozitivne na tioflavin S, ki se kolokalizirajo z α-sinukleinom, tau in αB-kristalinom, kar spominja na glialne citoplazemske vključke, opazne pri sinukleinopatijah, kot je multipla sistemska atrofija. Te stresno povzročene spremembe v topnosti beljakovin in sestavi agregatov poudarjajo uporabnost OLN-93 kot modelnega sistema za raziskovanje proteostaze, biologije šaperonov in celičnih odzivov oligodendrocitov na patološko agregacijo beljakovin.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo