OLN-93

OLN-93は、新生児ラット脳の初代グリア細胞培養から樹立された永続的なオリゴデンドログリア細胞株である。この細胞株は、混合グリア細胞培養において自然変異を起こした細胞に由来し、長期培養においても安定したオリゴデンドログリアの特性を維持することが確認されている。 OLN-93細胞は血清存在下で継続的に増殖し、倍加時間は約16～18時間であり、分化したオリゴデンドロサイトの主要な特徴を保持している。 免疫細胞化学的および生化学的解析により、これらの細胞は、ガラクトセレブロシド（GC）、ミエリン塩基性タンパク質（MBP）、ミエリン関連糖タンパク質（MAG）、プロテオリピドタンパク質（PLP）、およびウルフグラムタンパク質（WP）を含む主要なミエリン特異的マーカーを発現していることが示されています。 PLP およびそのオルタナティブスプライシングによるアイソフォーム DM20 の発現は、RT-PCR を用いて mRNA レベルで確認されています。

重要なことに、OLN-93 細胞は、アストロサイトマーカーであるビメンチンやグリア線維酸性タンパク質（GFAP）、あるいはオリゴデンドロサイト前駆体マーカーである A2B5 を発現しておらず、分化済みで前駆体ではない表現型であることを示しています。 形態学的には、標準的な培養条件下では双極性の外観を示し、低密度または低血清環境で培養すると樹状突起を発達させ、未熟な、あるいは生後早期のオリゴデンドロサイトに類似しています。これらの特性により、OLN-93 は、オリゴデンドロサイトの分化、ミエリンタンパク質の発現、および in vitro におけるニューロンや他のグリア細胞タイプとの相互作用を研究するための貴重なモデルとなっています。

OLN-93細胞は、神経変性疾患のプロセスを研究するために遺伝子改変も施されている。例えば、ヒトα-シヌクレイン（A53T変異体を含む）およびタウタンパク質を発現するようにトランスフェクトされた場合、ストレス下でのタンパク質凝集のメカニズムを調査するためのモデルとして機能する。 酸化ストレスやプロテアソームストレスに曝露されると、OLN-93細胞はチオフラビンS陽性の凝集体を形成し、これらはα-シヌクレイン、タウ、およびαB-クリスタリンと共局在し、多系統萎縮症などのシヌクレノパチーで見られるグリア細胞質内封入体に類似している。 タンパク質溶解性や凝集体組成におけるこうしたストレス誘発性の変化は、プロテオスタシス、シャペロン生物学、および病理学的タンパク質凝集体に対するオリゴデンドロサイトの細胞応答を解明するためのモデル系として、OLN-93の有用性を裏付けている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。