OLN-93

OLN-93 är en permanent oligodendroglial cellinje som härrör från primära gliaceller från nyfödda råttors hjärnor. Cellinjen har sitt ursprung i spontant transformerade celler i blandade gliaceller och har visat sig behålla stabila oligodendrogliala egenskaper under långa odlingsperioder. OLN-93-celler förökar sig kontinuerligt i närvaro av serum, med en fördubblingstid på cirka 16–18 timmar, och behåller viktiga egenskaper hos differentierade oligodendrocyter. Immunocytokemiska och biokemiska analyser visar att dessa celler uttrycker viktiga myelin-specifika markörer, inklusive galaktocerebrosid (GC), myelinbasiskt protein (MBP), myelinassocierat glykoprotein (MAG), proteolipidprotein (PLP) och Wolfgram-protein (WP). Uttrycket av PLP och dess alternativt splicade isoform DM20 har bekräftats på mRNA-nivå med hjälp av RT-PCR.

Viktigt är att OLN-93-celler inte uttrycker de astrocytiska markörerna vimentin och glialfibrillära sura proteinet (GFAP), inte heller oligodendrocytprekursormarkören A2B5, vilket indikerar en differentierad, icke-prekursorfenotyp. Morfologiskt uppvisar cellerna ett bipolärt utseende under standardodlingsförhållanden och utvecklar förgrenade utskott när de odlas vid låg densitet eller i miljöer med låg serumhalt, vilket liknar omogna eller tidiga postnatala oligodendrocyter. Dessa egenskaper gör OLN-93 till en värdefull modell för att studera oligodendrocytdifferentiering, myelinproteinexpression och interaktioner med neuroner eller andra typer av gliaceller in vitro.

OLN-93-celler har också genmanipulerats för att studera neurodegenerativa sjukdomsprocesser. När de till exempel transficeras för att uttrycka humant α-synuclein (inklusive A53T-mutanten) och tau-protein fungerar de som en modell för att undersöka mekanismerna bakom proteinaggregering under stress. Vid exponering för oxidativ och proteasomal stress bildar OLN-93-celler tioflavin S-positiva aggregat som samlokaliseras med α-synuclein, tau och αB-kristallin, vilket liknar gliala cytoplasmiska inklusioner som ses vid synucleinopatier såsom multipel systematrofi. Dessa stressinducerade förändringar i proteinlöslighet och aggregatsammansättning understryker OLN-93:s användbarhet som modellsystem för att utforska proteostas, chaperonbiologi och oligodendrocyternas cellulära svar på patologisk proteinaggregering.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring