OLN-93

OLN-93 là một dòng tế bào oligodendroglial vĩnh viễn được phân lập từ các nuôi cấy tế bào thần kinh đệm nguyên phát của não chuột sơ sinh. Dòng tế bào này có nguồn gốc từ các tế bào biến đổi tự phát trong các nuôi cấy hỗn hợp tế bào thần kinh đệm và được xác định là duy trì các đặc tính ổn định của tế bào oligodendroglial trong thời gian nuôi cấy kéo dài. Các tế bào OLN-93 sinh sôi liên tục khi có huyết thanh, với thời gian nhân đôi khoảng 16-18 giờ, và giữ được các đặc điểm chính của tế bào oligodendrocytes biệt hóa. Các phân tích miễn dịch hóa học và sinh hóa cho thấy các tế bào này biểu hiện các dấu hiệu đặc trưng chính của myelin bao gồm galactocerebroside (GC), protein cơ bản myelin (MBP), glycoprotein liên quan đến myelin (MAG), protein proteolipid (PLP) và protein Wolfgram (WP). Sự biểu hiện của PLP và đồng dạng ghép nối thay thế DM20 của nó đã được xác nhận ở cấp độ mRNA bằng cách sử dụng RT-PCR.

Điều quan trọng là, các tế bào OLN-93 không biểu hiện các dấu hiệu tế bào sao vimentin và protein axit sợi thần kinh đệm (GFAP), cũng như dấu hiệu tiền thân tế bào oligodendrocyte A2B5, cho thấy một kiểu hình đã biệt hóa, không phải tiền thân. Về mặt hình thái, các tế bào có hình dạng lưỡng cực dưới điều kiện nuôi cấy tiêu chuẩn và phát triển các quá trình nhánh khi được nuôi cấy ở mật độ thấp hoặc trong môi trường ít huyết thanh, tương tự như các tế bào oligodendrocyte chưa trưởng thành hoặc giai đoạn sớm sau sinh. Những đặc điểm này khiến OLN-93 trở thành một mô hình quý giá để nghiên cứu quá trình biệt hóa của tế bào oligodendrocyte, biểu hiện protein myelin và tương tác với các tế bào thần kinh hoặc các loại tế bào glial khác trong ống nghiệm.

Các tế bào OLN-93 cũng đã được biến đổi gen để nghiên cứu các quá trình bệnh thoái hóa thần kinh. Ví dụ, khi được chuyển gen để biểu hiện protein α-synuclein của người (bao gồm đột biến A53T) và protein tau, chúng đóng vai trò là mô hình để điều tra cơ chế kết tụ protein dưới tác động của stress. Khi tiếp xúc với stress oxy hóa và proteasome, tế bào OLN-93 hình thành các khối tụ dương tính với thioflavin S, đồng định vị với α-synuclein, tau và αB-crystallin, tương tự như các bao thể tế bào chất glial quan sát thấy trong các bệnh synucleinopathy như teo đa hệ thống. Những thay đổi do stress gây ra về độ hòa tan của protein và thành phần của các khối tụ này nhấn mạnh tính hữu ích của OLN-93 như một hệ thống mô hình để nghiên cứu sự cân bằng protein, sinh học của các protein chaperone và các phản ứng tế bào của oligodendrocytes đối với sự kết tụ protein bệnh lý.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.