OLN-93

OLN-93 هو خط خلوي دائم من الخلايا الأوليغوديندروغليالية، مشتق من مزارع خلايا دبقية أولية مستمدة من دماغ الفئران حديثي الولادة. نشأ هذا الخط الخلوي من خلايا تحولت تلقائيًا في مزارع خلايا دبقية مختلطة، وتميز بحفاظه على خصائص الخلايا الأوليغوديندروغليالية بشكل مستقر خلال فترات الاستزراع الطويلة. تتكاثر خلايا OLN-93 باستمرار في وجود المصل، مع وقت مضاعفة يبلغ حوالي 16-18 ساعة، وتحتفظ بالسمات الرئيسية للخلايا الدبقية الصغيرة المتمايزة. تُظهر التحليلات المناعية الكيميائية والكيميائية الحيوية أن هذه الخلايا تعبر عن علامات رئيسية خاصة بالميالين، بما في ذلك الجالاكتوسيربروزيد (GC)، والبروتين الأساسي للميالين (MBP)، والبروتين السكري المرتبط بالميالين (MAG)، والبروتين البروتوليبيدي (PLP)، وبروتين وولفغرام (WP). تم تأكيد التعبير عن PLP وشكله البديل DM20 على مستوى الحمض النووي الريبي المرسال (mRNA) باستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR).

والأهم من ذلك، أن خلايا OLN-93 لا تعبر عن علامات الخلايا النجمية فيمنتين والبروتين الحمضي الليفي الدبقي (GFAP)، ولا عن علامة سلف الخلايا القليلة التغصنات A2B5، مما يشير إلى نمط ظاهري متمايز وغير سلفي. من الناحية المورفولوجية، تظهر الخلايا مظهرًا ثنائي القطب في ظل ظروف الاستزراع القياسية وتطور عمليات شجرية عند نموها بكثافة منخفضة أو في بيئات منخفضة المصل، تشبه الخلايا الدبقية الصغيرة غير الناضجة أو في مرحلة ما بعد الولادة المبكرة. تجعل هذه الخصائص OLN-93 نموذجًا قيمًا لدراسة تمايز الخلايا الدبقية الصغيرة، وتعبير بروتين المايلين، والتفاعلات مع الخلايا العصبية أو أنواع الخلايا الدبقية الأخرى في المختبر.

كما تم تعديل خلايا OLN-93 وراثياً لدراسة عمليات الأمراض العصبية التنكسية. على سبيل المثال، عند نقلها للتعبير عن بروتين α-سينوكليين البشري (بما في ذلك المتحولة A53T) وبروتين تاو، فإنها تعمل كنموذج لدراسة آليات تراكم البروتين تحت الضغط. عند التعرض للإجهاد التأكسدي والبروتيازومي، تشكل خلايا OLN-93 تراكمات إيجابية لثيوفلافين S تتواجد في نفس الموقع مع α-سينوكليين وتاو وαB-كريستالين، تشبه الشوائب السيتوبلازمية الدبقية التي تظهر في أمراض السينوكليين مثل ضمور الجهاز المتعدد. تؤكد هذه التغيرات التي يسببها الإجهاد في قابلية البروتين للذوبان وتكوين التكتلات على فائدة OLN-93 كنظام نموذجي لاستكشاف التوازن البروتيني وبيولوجيا البروتينات المرافقة والاستجابات الخلوية للخلايا الدبقية الصغيرة لتكتل البروتين المرضي.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان