OLN-93

OLN-93 เป็นสายเซลล์โอลิโกเดนโดรเกลียลชนิดถาวรที่ได้จากวัฒนธรรมเซลล์เกลียของสมองลูกหนูแรกเกิด สายเซลล์นี้เกิดจากเซลล์ที่เปลี่ยนแปลงตัวเองโดยธรรมชาติในวัฒนธรรมเซลล์เกลียผสม และได้รับการศึกษาลักษณะเฉพาะเพื่อคงคุณสมบัติของโอลิโกเดนโดรเกลียลอย่างคงที่ตลอดระยะเวลาการเพาะเลี้ยงที่ยาวนาน เซลล์ OLN-93 แพร่พันธุ์อย่างต่อเนื่องในสภาวะที่มีซีรัม โดยมีเวลาในการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่าประมาณ 16-18 ชั่วโมง และยังคงลักษณะสำคัญของการเป็นโอลิโกเดนโดรไซต์ที่แตกต่างแล้ว การวิเคราะห์ทางอิมมูโนไซโตเคมีและชีวเคมีแสดงให้เห็นว่าเซลล์เหล่านี้แสดงเครื่องหมายเฉพาะของไมอีลินหลัก ได้แก่ กาแลคโตเซริโบรไซด์ (GC), โปรตีนพื้นฐานของไมอีลิน (MBP), ไกลโคโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับไมอีลิน (MAG), โปรตีนโปรตีโอไลปิด (PLP) และโปรตีนวูล์ฟแกรม (WP) การแสดงออกของ PLP และไอโซฟอร์มที่เกิดจากการสลับลำดับบางส่วน DM20 ได้รับการยืนยันในระดับ mRNA โดยใช้เทคนิค RT-PCR

ที่สำคัญคือ เซลล์ OLN-93 ไม่แสดงตัวบ่งชี้ของเซลล์แอสโทรไซต์อย่าง vimentin และ glial fibrillary acidic protein (GFAP) รวมถึงตัวบ่งชี้ของเซลล์โอลิโกเดนโดรไซต์ A2B5 ซึ่งบ่งชี้ถึงลักษณะที่แตกต่างและไม่เป็นเซลล์ต้นกำเนิด ในเชิงสัณฐานวิทยา เซลล์เหล่านี้มีลักษณะสองขั้วภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงมาตรฐาน และจะพัฒนาเป็นกระบวนการที่มีแขนงเมื่อเพาะเลี้ยงในความหนาแน่นต่ำหรือในสภาพแวดล้อมที่มีซีรัมต่ำ ซึ่งคล้ายกับโอลิโกเดนโดรไซต์ที่ยังไม่เจริญเต็มที่หรือระยะแรกหลังคลอด ลักษณะเหล่านี้ทำให้ OLN-93 เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการแยกแยะของโอลิโกเดนโดรไซต์ การแสดงออกของโปรตีนไมอีลิน และปฏิสัมพันธ์กับเซลล์ประสาทหรือเซลล์เกลียชนิดอื่นๆ ในหลอดทดลอง

เซลล์ OLN-93 ได้รับการดัดแปลงพันธุกรรมเพื่อศึกษาการเกิดโรคทางระบบประสาทเสื่อม ตัวอย่างเช่น เมื่อถูกถ่ายยีนให้แสดงโปรตีน α-synuclein ของมนุษย์ (รวมถึงตัวกลายพันธุ์ A53T) และโปรตีน tau เซลล์เหล่านี้ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองในการศึกษาการเกิดการรวมตัวของโปรตีนภายใต้สภาวะเครียด เมื่อเซลล์ OLN-93 ถูกสัมผัสกับความเครียดออกซิเดชันและโปรตีโอโซมอล เซลล์จะก่อตัวเป็นกลุ่มก้อนที่มีสีบวกกับไทโอฟลาวิน S ซึ่งอยู่ร่วมกับ α-synuclein, tau และ αB-crystallin โดยลักษณะคล้ายกับอินคลูชันในไซโทพลาสซึมของเซลล์เกลียที่พบในโรคซินิวคลีโอพาที เช่น โรคความเสื่อมหลายระบบ การเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากความเครียดในความละลายของโปรตีนและองค์ประกอบของกลุ่มโปรตีนที่รวมตัวกันนี้ เน้นย้ำถึงประโยชน์ของ OLN-93 ในฐานะระบบต้นแบบสำหรับการศึกษาการคงสภาพโปรตีน (proteostasis) ชีววิทยาของแชพาโรน (chaperone) และการตอบสนองของเซลล์โอลิโกเดนโดรไซต์ต่อการรวมตัวของโปรตีนในลักษณะผิดปกติ

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.