LP-1

A linhagem celular LP-1 é uma linhagem celular humana de mieloma múltiplo bem estabelecida, derivada de um paciente com mieloma múltiplo. Ela é caracterizada pela translocação t(4;14)(p16;q32), que resulta na expressão desregulada do receptor 3 do fator de crescimento fibroblástico (FGFR3). Essa aberração genética é uma característica marcante de um subconjunto de casos de mieloma múltiplo e está associada à patogênese e à progressão da doença. As células LP-1 expressam um FGFR3 funcional que, quando ativado, pode acionar a via de sinalização da MAP quinase, promovendo a proliferação e a sobrevivência celular. Notavelmente, a LP-1 apresenta uma mutação F384L não ativadora no gene FGFR3, o que a distingue de outras linhagens celulares de mieloma com mutações ativadoras do FGFR3.

As células LP-1 são úteis para estudar o papel do FGFR3 no mieloma múltiplo, particularmente no contexto de mutações não ativadoras. Pesquisas demonstraram que, no mieloma múltiplo, as mutações no FGFR3 e outras mutações oncogênicas comuns, como as da família Ras, são tipicamente mutuamente exclusivas, sugerindo que essas mutações podem contribuir para a tumorigênese por meio de vias semelhantes ou sobrepostas. Isso torna a LP-1 um modelo inestimável para explorar os mecanismos moleculares subjacentes ao mieloma múltiplo e para testar terapias direcionadas à via do FGFR3.

Além de sua relevância em estudos relacionados ao FGFR3, a LP-1 também é significativa em pesquisas focadas em aspectos mais amplos da biologia do mieloma, incluindo o papel de citocinas como a interleucina-6 (IL-6) na sobrevivência e proliferação celular. Essa linhagem celular tem sido fundamental em estudos que investigam as interações entre as células do mieloma e seu microambiente na medula óssea, bem como no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas destinadas a interromper essas interações para controlar a progressão da doença.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.