Mine otse sisu juurde
LP-1
Kude
Perifeerne veri
Haigus
Müeloomi hulgimüeloom
Sünonüümid
LP1

Dokumendid

LP-1

Cell line · Toote number 300321

The LP-1 cell line is a well-established human multiple myeloma cell line derived from a patient with multiple myeloma. It is characterized by its t(4;14)...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LP-1 rakuliin on hästi tõestatud inimese hulgimüeloomi rakuliin, mis on saadud hulgimüeloomiga patsiendilt. Seda iseloomustab t(4;14)(p16;q32) translokatsioon, mille tulemuseks on fibroblastide kasvufaktori retseptori 3 (FGFR3) düsreguleeritud ekspressioon. See geneetiline aberratsioon on iseloomulikuks tunnuseks hulgimüeloomi juhtude alamhulgale ning on seotud haiguse patogeneesi ja progresseerumisega. LP-1 rakud ekspresseerivad funktsionaalset FGFR3, mis aktiveerituna võib käivitada MAP-kinase signaalirada, soodustades rakkude proliferatsiooni ja ellujäämist. LP-1-l on FGFR3 geenis mitteaktiveeriv F384L-mutatsioon, mis eristab seda teistest müeloomi rakuliinidest, millel on FGFR3 aktiveerivad mutatsioonid.

LP-1 rakud on kasulikud FGFR3 rolli uurimiseks hulgimüeloomi puhul, eriti mitteaktiveerivate mutatsioonide kontekstis. Uuringud on näidanud, et hulgimüeloomi puhul on FGFR3 mutatsioonid ja muud levinud onkogeensed mutatsioonid, näiteks Ras-perekonna mutatsioonid, tavaliselt üksteist välistavad, mis viitab sellele, et need mutatsioonid võivad aidata kaasa kasvaja tekkimisele sarnaste või kattuvate radade kaudu. Seetõttu on LP-1 hindamatu väärtusega mudel, mille abil saab uurida molekulaarseid mehhanisme, mis on aluseks hulgimüeloomile, ja katsetada FGFR3-ravimite sihtotstarbelist ravi.

Lisaks oma tähtsusele FGFR3-ga seotud uuringutes on LP-1 oluline ka müeloomi bioloogia laiematele aspektidele keskenduvates uuringutes, sealhulgas tsütokiinide, nagu interleukiin-6 (IL-6), roll rakkude ellujäämises ja proliferatsioonis. See rakuliin on aidanud kaasa uuringutele, milles uuritakse müeloomirakkude ja nende luuüdi mikrokeskkonna vahelisi vastastikmõjusid, samuti uute ravistrateegiate väljatöötamisele, mille eesmärk on häirida neid vastastikmõjusid, et kontrollida haiguse progresseerumist.

Kude
Perifeerne veri
Haigus
Müeloomi hulgimüeloom
Rakendused
Mudel B-lümfotsüütide küpsemisprotsessi uurimiseks.
Sünonüümid
  • LP1

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Piklikud üksikud rakud
Karyotüüp
Kromosoomide modaalarv 73, jaotumine 60-79 kromosoomi vahel

04Tunnused

Viide
LP-1 (Cytioni katalooginumber 300321)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0012

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
IgG lambda

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
IMDM, w: 4,5 g/L glükoos, w: 4 mM L-glutamiin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820800a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendatakse keskkonda 20% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Soovitatav on külvata rakud 24-auguga plaadile ja kasvatada neid pärast sulatamist ühe nädala jooksul. Vahetage keskkond lahjendamise teel. Hiljem võib rakke kasvatada tavalistes rakukultuuri kolvides. Säilitage kultuur 0,5–1 x 106 rakku/ml. Inkubeerige 5% CO2 juures, 37 kraadi Celsiuse juures.
Külvitihedus
7 x 105 rakku/kaevu 24-kaevulises plaadis.
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist võib elujõulisus olla madal.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
56 aastat