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LP-1
Tecido
Sangue periférico
Doença
Mieloma múltiplo
Sinónimos
LP1

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LP-1

Cell line · Número do produto 300321

The LP-1 cell line is a well-established human multiple myeloma cell line derived from a patient with multiple myeloma. It is characterized by its t(4;14)...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular LP-1 é uma linha celular de mieloma múltiplo humano bem estabelecida, derivada de um doente com mieloma múltiplo. É caracterizada pela sua translocação t(4;14)(p16;q32), que resulta na expressão desregulada do recetor 3 do fator de crescimento dos fibroblastos (FGFR3). Esta aberração genética é uma caraterística de um subconjunto de casos de mieloma múltiplo e está associada à patogénese e progressão da doença. As células LP-1 expressam um FGFR3 funcional, que, quando ativado, pode envolver a via de sinalização da MAP quinase, promovendo a proliferação e sobrevivência celular. Em particular, a LP-1 é portadora de uma mutação F384L não activadora no gene FGFR3, o que a distingue de outras linhas celulares de mieloma com mutações activadoras do FGFR3.

As células LP-1 são úteis para estudar o papel do FGFR3 no mieloma múltiplo, particularmente no contexto de mutações não activadoras. A investigação demonstrou que, no mieloma múltiplo, as mutações do FGFR3 e outras mutações oncogénicas comuns, como as da família Ras, são normalmente mutuamente exclusivas, sugerindo que estas mutações podem contribuir para a tumorigénese através de vias semelhantes ou sobrepostas. Isto faz da LP-1 um modelo inestimável para explorar os mecanismos moleculares subjacentes ao mieloma múltiplo e para testar terapias direcionadas para a via do FGFR3.

Para além da sua relevância nos estudos relacionados com o FGFR3, a LP-1 é também importante na investigação centrada nos aspectos mais gerais da biologia do mieloma, incluindo o papel de citocinas como a interleucina-6 (IL-6) na sobrevivência e proliferação celular. Esta linha celular tem sido fundamental em estudos que investigam as interações entre as células do mieloma e o seu microambiente da medula óssea, bem como no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas destinadas a perturbar estas interações para controlar a progressão da doença.

Tecido
Sangue periférico
Doença
Mieloma múltiplo
Aplicações
Modelo para estudar o processo de maturação dos linfócitos B.
Sinónimos
  • LP1

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Células individuais alongadas
Cariótipo
Número modal de cromossomas 73, distribuição de 60 a 79 cromossomas

04Identificadores

Referência
LP-1 (número de catálogo Cytion 300321)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0012

05Expressão e suscetibilidade

Produtos
IgG lambda

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
IMDM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-glutamina, com: 25 mM de HEPES, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 3,024 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820800a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 20% de FBS inactivado pelo calor
Subcultura
Recomenda-se semear as células numa placa de 24 poços e cultivá-las durante uma semana após o descongelamento. Troque o meio por diluição. Posteriormente, as células podem ser cultivadas em frascos de cultura celular normais. Mantenha a cultura entre 0,5 e 1 x 106 células/ml. Incube a 5% de CO2, 37 graus Celsius.
Densidade de sementeira
7 x 105 células/poço de uma placa de 24 poços.
Recuperação após o descongelamento
A viabilidade pode ser baixa após a descongelação.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
56 anos