Preskoči na vsebino
LP-1
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Multipli mielom
Sinonimi
LP1

Dokumenti

LP-1

Cell line · Številka izdelka 300321

The LP-1 cell line is a well-established human multiple myeloma cell line derived from a patient with multiple myeloma. It is characterized by its t(4;14)...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija LP-1 je dobro uveljavljena celična linija človeškega multiplega mieloma, pridobljena od bolnika z multiplim mielomom. Zanjo je značilna translokacija t(4;14)(p16;q32), ki povzroča moteno izražanje receptorja za fibroblastni rastni dejavnik 3 (FGFR3). Ta genetska aberacija je značilna za podskupino primerov multiplega mieloma ter je povezana s patogenezo in napredovanjem bolezni. Celice LP-1 izražajo funkcionalen FGFR3, ki lahko ob aktivaciji vključi signalno pot MAP-kinaze, kar spodbuja proliferacijo in preživetje celic. LP-1 ima neaktivno mutacijo F384L v genu FGFR3, po čemer se razlikuje od drugih mielomskih celičnih linij z aktivnimi mutacijami FGFR3.

Celice LP-1 so uporabne za preučevanje vloge FGFR3 v multiplem mielomu, zlasti v kontekstu neaktivnih mutacij. Raziskave so pokazale, da se mutacije FGFR3 in druge pogoste onkogene mutacije, kot so mutacije v družini Ras, pri multiplem mielomu običajno izključujejo, kar nakazuje, da lahko te mutacije prispevajo k tumorigenezi po podobnih ali prekrivajočih se poteh. Zato je LP-1 neprecenljiv model za raziskovanje molekularnih mehanizmov, na katerih temelji multipli mielom, in za preizkušanje ciljnih terapij, usmerjenih na pot FGFR3.

Poleg tega, da je LP-1 pomemben za študije, povezane s FGFR3, je pomemben tudi za raziskave, ki se osredotočajo na širše vidike biologije mieloma, vključno z vlogo citokinov, kot je interlevkin-6 (IL-6), pri preživetju in proliferaciji celic. Ta celična linija je bila ključnega pomena v študijah, ki so preučevale interakcije med mielomskimi celicami in njihovim mikrookoljem v kostnem mozgu, ter pri razvoju novih terapevtskih strategij, katerih cilj je prekiniti te interakcije in tako nadzorovati napredovanje bolezni.

Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Multipli mielom
Uporaba
Model za preučevanje procesa zorenja limfocitov B.
Sinonimi
  • LP1

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Podolgovate posamezne celice
Kariotip
Modalno število kromosomov 73, porazdelitev od 60 do 79 kromosomov

04Identifikatorji

Navajanje vira
LP-1 (kataloška številka Cytion 300321)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0012

05Izražanje in dovzetnost

Izdelki
IgG lambda

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
IMDM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 3,024 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820800a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 20 % toplotno inaktiviranega FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Priporočljivo je, da celice posejete v ploščo z 24 jamicami in jih po odmrzovanju gojite en teden. Medij zamenjajte z razredčitvijo. Kasneje lahko celice gojite v običajnih kolbah za celično kulturo. Ohranjajte kulturo med 0,5 in 1 x 106 celic/ml. Inkubirajte pri 5 % CO2 in 37 stopinjah Celzija.
Gostota setve
7 x 105 celic/jamico v 24-jamčni plošči.
Obnova po odtaljevanju
Po odmrznitvi je vitalnost lahko nizka.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
56 let