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SW620-Luc
Gewebe
Metastasen
Krankheit
Adenokarzinom des Dickdarms
Metastasenherd
Lymphknoten
Synonyme
SW620, SW 620, SW.620

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SW620-Luc

Cell line · Artikelnummer 305704

SW620-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der menschlichen Zelllinie SW620, die aus einem metastasierenden Kolonadenokarzinom stammt und so modifiziert wurde, dass sie stabil ein Feuerfliegen-Luciferase-Gen exprimiert...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

SW620-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der humanen metastasierenden Kolonadenokarzinom-Zelllinie SW620, das so modifiziert wurde, dass es ein Firefly-Luciferase-Reportergen stabil exprimiert. Die ursprüngliche SW620-Zelllinie wurde aus einer Lymphknotenmetastase desselben Patienten gewonnen, von dem auch die SW480-Zelllinie etabliert wurde, was vergleichende Paarstudien zur Biologie von Darmkrebs zwischen Primärtumor und Metastasen ermöglicht. SW620-Zellen weisen eine epitheliumähnliche Morphologie auf und teilen die gleichen onkogenen Schlüsselmutationen wie SW480, darunter KRAS G12V, TP53 R273H und P309S sowie eine APC-Trunkierung, zeigen jedoch mehr mesenchymale Merkmale und ein größeres Invasionspotenzial, was mit ihrem metastatischen Ursprung übereinstimmt. SW620 wird häufig zur Untersuchung von Kolorektalkrebsmetastasen, der epithelial-mesenchymalen Transition (EMT) und therapeutischen Resistenzmechanismen eingesetzt.

Die stabile Luciferase-Integration in SW620-Luc ermöglicht eine empfindliche, quantitative Biolumineszenz-Bildgebung (BLI) der Tumorlast in Xenotransplantat- und experimentellen Metastasierungsmodellen bei immungeschwächten Wirten. Das emittierte Signal korreliert mit der Anzahl lebensfähiger Tumorzellen und unterstützt die longitudinale Überwachung der Tumoransiedlung, der Wachstumskinetik, der Leberkolonisierung und der Lymphknotendissemination. SW620-Luc ist besonders wertvoll für die Untersuchung des metastatischen Fortschreitens von Darmkrebs, die Bewertung von Antimetastasenmitteln und die Durchführung vergleichender In-vivo-Studien mit der passenden primären SW480-Linie.

SW620-Luc behält das molekulare Profil und den metastatischen Phänotyp der Elternlinie SW620 bei, einschließlich der KRAS- und TP53-Mutationen. Die Luciferase-Modifikation verbessert den experimentellen Durchsatz und die Sensitivität für die pharmakodynamische In-vivo-Bewertung der Wirksamkeit einer Behandlung erheblich. Forscher sollten die Luciferase-Aktivität, das Mutationsprofil und die Wachstumskinetik unter ihren spezifischen Versuchsbedingungen vor einer groß angelegten präklinischen Anwendung überprüfen.

Gewebe
Metastasen
Krankheit
Adenokarzinom des Dickdarms
Metastasenherd
Lymphknoten
Synonyme
  • SW620
  • SW 620
  • SW.620

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, in athymischen Nacktmäusen

04Bezeichner

Quellenangabe
SW620-Luc (Cytion-Katalognummer 305704)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_J268

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Luc2 (Firefly, codonoptimiert)
Mutationsprofil
Mutation: p.Gln1338Ter, Homozygot; Mutation: p.Gly12Val, Homozygot; Mutation: p.Arg273His, Heterozygot; Mutation: p.Pro309Ser, Heterozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
51 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch