Pāriet uz saturu
SW620-Luc
Audums
Metastātisks
Slimība
Resnās zarnas adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
SW620, SW 620, SW.620

Dokumenti

SW620-Luc

Cell line · Preces numurs 305704

SW620-Luc ir cilvēka SW620 metastātiskās resnās zarnas adenokarcinomas šūnu līnijas bioluminiscējošs atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskrēsliņa luciferāzes gēnu...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SW620-Luc ir cilvēka metastātiskās resnās zarnas adenokarcinomas šūnu līnijas SW620 bioluminiscents atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskrēsliņa luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā SW620 šūnu līnija tika iegūta no limfmezglu metastāzes tam pašam pacientam, no kura tika izveidota SW480 līnija, tādējādi ļaujot veikt salīdzinošus pētījumus par kolorektālā vēža bioloģiju, izmantojot primāro audzēju un metastāžu paraugus. SW620 šūnas uzrāda epitēlija tipa morfoloģiju un tām ir tādas pašas galvenās onkogēnās mutācijas kā SW480, tostarp KRAS G12V, TP53 R273H un P309S, kā arī APC trunka, taču tām piemīt vairāk mezenhīmālas pazīmes un lielāks invazīvais potenciāls, kas atbilst to metastātiskajai izcelsmei. SW620 tiek plaši izmantots, lai pētītu kolorektālā vēža metastāzes, epitēlija-mezodermālo pāreju (EMT) un terapeitiskās rezistences mehānismus.

Stabila luciferāzes integrācija SW620-Luc ļauj veikt jutīgu, kvantitatīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI) audzēja apjomam ksenotransplantātu un eksperimentālos metastāžu modeļos imūndeficītiem saņēmējiem. Izstarotais signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, atbalstot audzēja ieaugšanas, augšanas kinētikas, aknu kolonizācijas un limfmezglu izplatības garenisko monitoringu. SW620-Luc ir īpaši vērtīgs kolorektālā vēža metastāžu progresijas pētīšanai, pretmetastāžu līdzekļu novērtēšanai un salīdzinošu in vivo pētījumu veikšanai ar atbilstošo primāro SW480 līniju.

SW620-Luc saglabā vecāku SW620 līnijas molekulāro profilu un metastāzes fenotipu, ieskaitot KRAS un TP53 mutācijas. Luciferāzes modifikācija ievērojami uzlabo eksperimentālo caurlaidspēju un jutību ārstēšanas efektivitātes in vivo farmakodinamiskai novērtēšanai. Pētniekiem pirms plaša mēroga pirmsklīniskas lietošanas ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, mutāciju profils un augšanas kinētika savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Metastātisks
Slimība
Resnās zarnas adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Limfmezgls
Sinonīmi
  • SW620
  • SW 620
  • SW.620

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, athimiskām kailām pelēm

04Identifikatori

Atsauce
SW620-Luc (Cytion kataloga numurs 305704)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_J268

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)
Mutāciju profils
Mutācija: p.Gln1338Ter, homozigots; Mutācija: p.Gly12Val, homozigots; Mutācija: p.Arg273His, heterozigots; Mutācija: p.Pro309Ser, heterozigots

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
51 gads
Etniskā piederība
Kaukāzietis